本研究以农副产品下脚料麦麸、脱油类棉籽饼、花生饼和芝麻饼为研究对象，以污水处理厂活性污泥和堆肥为微生物来源，通过厌氧发酵制备生物氢气。系统考察了pH值、污泥浓度、底物浓度、搅拌速度和温度等对产氢能力的影响，以及不同预处理方法对底物产氢能力的影响，取得了有意义的结果。 实验结果表明：生态因子是影响底物产氢的重要因素，最佳产氢条件随底物的不同而不同。例如：麦麸生物产氢的最佳条件是：反应pH值为5.0，初始pH值为7.0左右，底物浓度为100mg／ml，污泥浓度为80mg／ml；棉籽饼生物产氢的最佳条件是：温度为36℃，转速为90r／min，浓度为100g／L；花生饼生物产氢的最佳条件是：温度为36℃，转速为90r／min，浓度为80g／L；芝麻饼生物产氢的最佳条件是：温度为30℃，转速为90r／min，浓度为100g／L。不同底物的最大产氢潜势如下：麦麸的累积产氢量103.6ml／g，最大氢浓度62％；棉籽饼的累积产氢量24.0ml／g，最大氢浓度47.1％；花生饼的累积产氢量27.4ml／g，最大氢浓度48.9％；芝麻饼的累积产氢量24.1ml／g，最大氢浓度63.2％。如果在底物发酵前增加预处理工序，可不同程度的提高底物的产氢能力，与对照实验相比，麦麸经方法(1)预处理后产氢能力增加了72.7％；棉籽饼产氢能力增加了32.5％；花生饼产氢能力增加了3.5倍：芝麻饼产氢能力增加了22.8％。在其它微生物协同产氢方面，米酒协同产氢菌在利用麦麸产氢时最佳初始pH值为5.5；对棉籽饼和芝麻饼来说，米酒的协同作用优于酵母素的协同作用，而对花生饼来说则相反，酵母素的协同作用优于米酒的协同作用。底物发酵末端产物中醇类的浓度在发酵初期逐渐增大，直至稳定到一个浓度范围，而酸类在发酵初期浓度逐渐增大，达到一个最高点后回落，直至稳定。这说明微生物在利用酸类产氢的过程中产生了醇类。