不同耐盐紫花苜蓿SSR分子标记遗传多样性研究

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本论文以60份紫花苜蓿材料为研究对象,对其进行了苗期的耐盐性评价及不同耐盐品种紫花苜蓿的遗传多样性分析,旨为紫花苜蓿新品种培育和种质资源开发利用提供理论依据。主要研究结果如下:(1)紫花苜蓿苗期的耐盐性评价:以60个国内外紫花苜蓿品种为试材,通过表型鉴定的方法初步筛选出5个耐盐、5个敏盐品种;利用IBM SPSS Statistics 19软件对初步筛选出的品种的叶绿素含量、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)活性及丙二醛(MDA)含量、根长与株高的相对抑制率进行主成分分析、隶属函数、系统聚类等方法进行分析。根据综合评价值(D值)对耐盐性进行强弱排序,结果表明:在100mmolL-1NaC1胁迫下,秘鲁>Asi>草原3号>兴平>国产苜蓿:在250mmo1-L-1 NaC1胁迫下,巨能>阿迪娜>巨能7号>骑士T> 抗旱15。对D值进行聚类分析,结果表明:5份敏盐材料可划分为3类:秘鲁、Asi、草原3号为一类,属于强耐盐性;兴平为一类,属于中度耐盐性;国产苜蓿为一类,属于弱耐盐性;5份耐盐材料可划分为3类:阿迪娜和巨能为一类,属于强耐盐性;巨能7号为一类,属于中度耐盐性;抗旱15和骑士 T为一类,属于弱耐盐性。(2)不同耐盐品种紫花苜蓿遗传多样性分析:①用SSR分子标记的方法对5份耐盐紫花首蓿材料和5份敏盐紫花首蓿材料进行遗传多样性分析结果表明:从42对微卫星引物中,经过筛选获得具有多态性且条带清晰的微卫星引物有9条;利用9条微卫星引物在10个紫花苜蓿品种110个单株中共检测到738个位点,其中单态性位点331个,多态性位点407个,总多态位点百分率为55.149%;有效等位基因观察数与等位基因观察数的比为0.521;平均杂合度为0.799;平均香农指数为1.886;平均多态性息含量为0.799;利用IBM SPSS Statistics 19软件对10份紫花苜蓿品种的平均多态位点百分率、平均杂合度、平均PNe/Ao、平均香农指数、平均多态性息含量进行综合评价,根据综合评价值(D值)对10个紫花苜蓿品种内的遗传变异程度大小排序:巨能>骑士 巨能7号>Asi>兴平>阿迪娜>秘鲁>抗旱15>草原3号>国产苜蓿,说明这10份紫花苜蓿材料具有较高的遗传多样性。②材料间的遗传分化系数(Gst)为0.100说明这10份紫花苜蓿材料的绝大部分遗传变异都发生在各品种的内部。利用 MEGA6.0 软件对 Nei 遗传距离进行 Neighbor-Joining(NJ)、Minimum Evolution(ME)、UPGMA聚类分析可知:5份敏盐材料始终聚为一类,说明这5份材料的亲缘关系较近;巨能与巨能7号聚为一类说明它们的亲缘关系较近;抗旱15在NJ和ME聚类分析中始终相对独立与其他材料间的遗传距离较大亲缘关系较远;在ME聚类分析中阿迪娜和骑士 T聚为一类而在UPGMA聚类分析中阿迪娜和抗旱15又聚为一类。说明阿迪娜与抗旱15和骑士 T有较近的亲缘关系。
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