地被菊未授粉胚珠培养

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地被菊是重要的园林地被植物。地被菊具高度杂合,遗传背景复杂,因而难以通过传统方法得到纯合自交系。通过花药或未授粉胚珠培养诱导单倍体则可在加倍后获得纯系,提高育种效率。已有研究通过地被菊花药培养获得单倍体植株,但地被菊未授粉胚珠培养未见相关研究报道。本研究希望通过地被菊未授粉胚珠培养获得单倍体植株,并探讨离体雌核发育机理。实验研究了影响地被菊胚珠培养的各种因素,并获得单倍体。对不同倍性再生植株气孔及形态特征进行统计分析,对离体雌核发育过程进行切片观察。主要研究成果如下:1.地被菊花序形态和胚囊发育时期具有相关性。胚囊发育成熟,舌状花完全展开,管状花即将开放时胚珠诱导效果最佳。2.不同基因型地被菊诱导培养基不同。基因型WS最适培养基为MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖30g/L或MS+6一BA2.0mg/L+NAAO.5mg/L+蔗糖60g/L。基因型PD为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖30g/L。分化培养基为MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.05mg/L+30g/L蔗糖。3.光照条件下胚珠愈伤组织诱导率显著高于黑暗条件。WS光照条件下诱导率为68.9%,黑暗条件下仅为4.4%。4.低温预处理对胚珠培养有一定促进作用。4℃预处理3天胚珠诱导率最高,为76.25%。5.实验共获再生植株75株,对20株WS再生植株检测获得单倍体(n=3x=27)、四倍体(2n=4x=36)、非整倍体(2n=5x-3=42)、五倍体(2n=5x=45)各一株,并进行染色体核型分析。6.地被菊胚珠培养3天时极核和反足细胞开始启动分裂。胚囊合点端和珠孔端均能形成胚状体,合点端胚状体推测为反足细胞起源,珠孔端胚状体可能由卵细胞或助细胞发育而来。
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