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本论文研究了中兽药复方制剂“连藤”的质量标准和体外抗菌作用、亚慢性毒性试验以及对人工感染鸡白痢沙门氏菌病的预防效果,旨在为复方制剂“连藤”的开发及临床应用提供理论依据。方法:(1)采用水提醇沉法提取由青风藤、黄花败酱草等配伍组成的复方制剂“连藤”,并采用薄层色谱法对复方制剂“连藤”提取液中的芒柄花素和连翘苷进行鉴别以及高效液相色谱法对其含量进行测定,建立中兽药复方制剂“连藤”的质量标准。(2)采用药敏纸片法测定不同浓度的中兽药复方制剂“连藤”提取液分别对鸡大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的体外抑菌效果,同时用试管2倍稀释法测定相应的最小抑菌浓度。(3)用不同剂量(2.5 g.kg-1.bw-1、5.0 g.kg-1.bw-1、10.0 g.kg-1.bw-1)的复方制剂“连藤”灌胃昆明系小鼠,进行复方制剂“连藤”的亚慢性毒性试验,测定小鼠的脏器指数、血液中谷丙转氨酶、谷草转氨酶活性、肌酐含量,并进行血液中白细胞总数及白细胞分类计数和试验小鼠肝脏、肾脏的病理组织学观察。(4)在饲料中添加不同剂量(1.0 g.kg-1、2.0 g.kg-1、4.0 g.kg-1)的复方制剂“连藤”,通过临床症状、发病情况以及血中活菌计数研究复方制剂“连藤”对人工感染鸡白痢沙门氏菌病的预防效果。结果:(1)薄层鉴别的色谱分离良好,斑点清晰;连翘苷在进样质量浓度为8~100μg·mL-1范围内线性关系良好(R2=0.9995),平均回收率为96.40%(n=6);芒柄花素在进样质量浓度为6~150μg·mL-1范围内线性关系良好(R2=0.9998),平均回收率为95.13%(n=6);在原药浓度为0.1 g.mL-1的复方制剂“连藤”提取液中连翘苷和芒柄花素的含量分别为47.34μg·mL-1和35.30 μg.mL-1。(2)体外抑菌试验结果显示,浓度为1 g.mL-1的复方制剂“连藤”提取物对鸡大肠杆菌的抑菌圈直径为10.58±1.62mm,为中度敏感,而对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径为16.20±0.42mm,为高度敏感;浓度为100 mg.mL-1的复方制剂“连藤”提取物对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径为12.35±1.15 mm,为中度敏感。此外,复方制剂“连藤”提取液对金黄色葡萄球菌和鸡大肠杆菌的最小抑菌浓度分别为3.906 mg.mL-1和31.250 mg.mL-1。(3)亚慢性毒性试验结果显示,与空白对照组比较,复方制剂“连藤”对小鼠的增重和饲料利用率无显著性影响(P>0.05);高剂量组的肝脏指数极显著升高(P<0.01),脾脏指数显著升高(P<0.05),而肾脏指数差异不显著(P>0.05),中、低剂量组小鼠的各个脏器指数差异不显著(P>0.05);高、中、低剂量组小鼠血清中的谷丙转氨酶和谷草转氨酶的活性均升高,但除了中剂量组小鼠血清的谷草转氨酶活性差异显著外(P<0.05),其他各组均无显著差异(P>0.05);高、中、低剂量组小鼠血清中的肌酐水平均无显著差异(P>0.05);高、中、低剂量组小鼠血液中的白细胞总数有所降低,小鼠血液中淋巴细胞比例有所升高,但无显著性差异(P>0.05);小鼠的肝脏、肾脏无明显的病理组织学损伤。(4)复方制剂“连藤”能降低鸡人工感染沙门氏菌的死亡率,表明该制剂对鸡白痢有一定的预防作用。结论:(1)本研究建立了复方制剂“连藤”的HPLC质量分析方法,可用于中兽药复方制剂“连藤”的质量标准检测;(2)复方制剂“连藤”对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均有较好的抑菌效果;(3)亚慢性毒性试验结果表明复方制剂“连藤”实际无毒,安全性好;(4)复方制剂“连藤”对人工感染鸡白痢沙门氏菌具有一定的预防作用。