热休克蛋白90(HSP90)是热休克蛋白家族中重要的一员，它是细胞中表达量很高的一类分子伴侣。HSP90在胞浆内主要以同源二聚体的形式存在，每个同源二聚体又由2个单体构成。HSP90单体包括3个主要的结构域:有1个保守N末端结构域、1个C末端结构域和1个中间结构域，中间结构域和N端结构域之间还有一个高电荷铰链区将二者相连。HSP90除了可将新生肽链或非天然态的蛋白质折叠成具有天然态的功能蛋白外，还参与信号转导因子构象的变化过程，通过对底物蛋白的作用，影响疾病的发生和发展。其底物或称“客户蛋白”大多数是控制细胞复制和存活的包括肿瘤细胞转移的信号转导因子，对HSP90的客户蛋白参与细胞代谢的研究很少。　　依赖于5’-AMP激活的蛋白激酶（AMPK）是一种苏氨酸/丝氨酸激酶，酵母和哺乳动物来源的AMPK都是由具有催化作用的α亚基、起调节作用的β亚基和起调节作用同时结合底物的γ亚基组成的异源三聚体。AMPK在细胞能量的动态平衡中扮演了重要的角色，是维持细胞内ATP:ADP比率的腺苷酸激酶反应的关键酶，就像细胞内的“能量开关”，在细胞能量不足的状态下会被激活，磷酸化多种底物，关闭ATP的消耗途径，同时打开ATP的生成途径。　　已经有研究表明HSP90和AMPK在体内存在着某种联系，然而还未见HSP90与AMPK存在直接相互作用的报道。在本文中，通过HSP90的体外ATP酶活实验、ForteBio OctetRed实验、BIAcore实验和GST Pull Down实验发现了HSP90和细胞能量代谢过程中的关键酶AMPK存在较强的相互作用，其中Fortebio OctetRed、BIAcore实验中得到二者的解离常数均约为10-8mol/L，并通过对HSP90的区段和AMPK的α、γ亚基及截短的α亚基片段之间的ForteBioOctetRed实验发现HSP90的N端、M端、C端与AMPK的α、γ亚基均存在较强的结合作用，解离常数均约为10-8mol/L，其中HSP90与AMPKα亚基的亲和力略高于AMPKγ亚基，HSP90 N端结构域与AMPK的亲和力略高于HSP90的M端和C端结构域，表明HSP90的N端结构域和AMPKα亚基可能是二者结合的主要区域。将AMPKα截短至催化区域的1-200位氨基酸，发现其仍能与HSP90发生特异性结合，揭示二者之间的结合位点中一定有某个或某几个结合位点位于AMPKα亚基催化区域的前200个氨基酸中。在研究HSP90和AMPK的相互作用的同时尝试引入小分子化合物，初步探讨了小分子化合物对二者相互作用的影响，ForteBio OctetRed先后结合系列实验中显示同时与HSP90和AMPK存在较强结合作用的化合物Gambogic acid和al会干扰HSP90与AMPK之间的相互作用，而HSP90的专性抑制剂Geldanamycin未显示出干扰作用。　　这些研究及发现不仅扩展了HSP90的客户蛋白群，揭示了肿瘤细胞中HSP90参与脂肪酸代谢的新机制，同时对筛选针对HSP90-客户蛋白相互作用的抑制剂的方法进行了初步的研究，为寻找靶向更明确的药物提供了新的思路。