论文部分内容阅读
为了探明Pb2+对两栖动物的雄性生殖毒性及其作用机制,本文以黑斑蛙(Rana nigromaculata)为模式动物,通过皮肤染毒,采用慢性毒性实验法,检测了Pb2+对黑斑蛙精子数量精子畸形率、精子活力以及血清中睾酮和p-雌二醇含量的影响,探讨了铅对两栖动物的雄性生殖毒性效应；从Pb2+对精巢ATP酶(Ca2+-ATPase、Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase)活性的影响、Pb2+致精巢脂质过氧化(MDA、GSH)和对抗氧化酶系(SOD、CAT、GSH-Px)活性的影响、Pb2+对精巢组织标志酶(ACP、AKP、β-DG、LDH)活性的影响以及Pb2+对精巢组织DNA损伤的影响四大方面探讨了铅对两栖动物的雄性生殖毒性机制。主要研究结果概括如下：1.黑斑蛙在不同浓度Pb2+染毒下,精子数量下降,在1.6mg/L Pb2+染毒组,精子总数与对照组比较有显著性差异(P<0.05)；Pb2+可使黑斑蛙精子质量衰退,在0.4～1.6mg/L Pb2+染毒组,精子畸形率、原地不动精子比率以及精子活率与对照组比均有显著性差异,且有明确的剂量-效应关系,相关系数r依次为0.987、0.945、-0.904。2.一定浓度的Pb2+可导致黑斑蛙血清睾酮含量的降低、p-雌二醇含量的升高,且均呈明显的剂量-效应关系,相关系数r依次-0.991,0.927；T/E2呈下降趋势,与染铅剂量之间呈指数负相关(r=-0.975,P<0.01)。3.在0.1～1.6mg/L Pb2+染毒下,黑斑蛙精巢组织Ca2+-ATPase和Na+-K+-ATPase均被诱导,且除0.1mg、L Pb2+染毒组外,其余各处理组酶活性都显著高于对照组；Ca2+-Mg2+-ATPase(?)舌性除0.1mg/L Pb2+处理组外,其余各染毒组活性均显著低于对照组,且随染毒剂量的增加而呈剂量依赖性降低(相关系数r=-0.901,P<0.01)。4.Pb2+可引起黑斑蛙精巢脂质过氧化损伤。随着Pb2+染毒剂量的增加,精巢MDA含量显著升高,与对照组比均具有显著性差异,且呈现明显的剂量-效应关系(相关系数r=0.933,P<0.01)；同时,一定浓度的Pb2+对黑斑蛙精巢组织GSH含量CAT活性、GSH-Px活性具有显著诱导作用,但各染毒组精巢SOD酶活性与对照组比均无显著性差异5.Pb2+对黑斑蛙精巢组织标志酶活性的影响结果表明：AKP活性在0.1mg/L Pb2+染毒组显著高于对照组,在0.8、1.6mg/L Pb2+染毒组显著低于对照组；ACP酶活性在1.6mg/L Pb2+染毒组显著低于对照组；LDH酶活性在0.4mg/L Pb2+染毒组显著高于对照组,在1.6mg/L Pb2+染毒组回落至对照组水平；精巢p-DG的活性在0.2mg/L、0.4mg/L Pb2+染毒组就呈明显下降趋势。Pb2+对精巢LDH同工酶的影响主要表现为LDH2酶带的缺失和各酶带活性的增强。6.Pb2+对黑斑蛙精巢组织DNA的影响结果表明：黑斑蛙精巢中DNA损伤率、尾长和尾相均随Pb2+染毒剂量的增加而呈上升趋势,且存在明显的剂量-效应关系,相关系数r值依次为0.979、0.982、0.982。说明Pb2+可导致黑斑蛙精巢DNA损伤。