脆壁克鲁维酵母KfADE5,7基因的克隆及其结构与功能的研究

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ADE5,7基因是腺嘌呤从头合成途径中一个重要的基因,在酵母中它编码催化第2步和第5步反应的两个酶.该文首次通过补偿乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)KlADE5.7基因突变,从脆壁克鲁维酵母(Kluyveromycesfragilis)基因组文库中成功克隆了KfADE5,7基因.经DNA序列测定,该基因全长4975bp,可编码793个氨基酸.其氨基酸序列与已知的乳酸克鲁维酵母ADE5,7基因编码区有87.3﹪的同源度.利用KfADE5,7-lacZ融合基因,对5非编码区进行缺失分析,发现了具有完整启动子功能的区域.在启动子上游还发现存在两个区域可以增强转录,两个区域可以减弱转录.另外,该文构建了分别带有G418抗性和Zeocin抗性的基因中断载体,尝试对KfADE5,7基因进行中断.KfADE5,7基因的克隆及其结构和功能的研究,有助于了解脆壁克鲁维酵母中嘌呤代谢相关基因的表达调控机制,并为研究新表达系统提供选择标记.
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