蚕豆根细胞彗星试验方法的建立及应用

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环境遗传毒性的生物监测,对综合评价环境致突变/致癌物的污染水平,预测环境污染对人体的潜在危害具有十分重要意义.然而目前可应用的监测方法太少,灵敏度不够高.该研究拟通过改良彗性试验,建立适合于蚕豆根细胞的方法,同时通过检测几种不同类型致突变物和现场采集水样对蚕豆根细胞DNA的员伤作用,对新建方法的可靠性和实用性进行初步评价.该研究通过比较慧星试验的裂解、解旋和电泳条件对小鼠骨髓细胞与蚕豆根细胞的影响,发现:a)裂解可以清除被EB染色的木质素和叶绿体,使镜下背景变得干净,对提取的蚕豆根细胞核的慧星试验,裂解仍然是不可缺少的重要步骤.b)在同一pH条件下,蚕豆根细胞核DNA更松散,常规慧星试验的碱性解旋、碱性电泳条件(pH>13)不适合蚕豆根细胞.为此,该研究提出了碱性解旋(pH=13)、中性电泳的改良蚕豆根细胞慧性试验(亦称中性慧性试验).通过该研究,将慧星试验运用于植物监测系统,建立了中性蚕豆根细胞慧星试验.该试验更灵敏、快速、简便,适合于污染水体的原位监测.该试验的建立对完善植物检测系统,促进环境致突变/致癌物污染的环境生物监测具有重要意义.
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