MdbHLH3转基因苹果果实采后贮藏性能的研究

来源 :山东农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lanshi2008
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bHLH转录因子家族是植物第二大超基因家族,是果实采后成熟的重要调控因子。实验室前期研究发现,b HLH转录因子MdbHLH3能够促进花青素积累和果实着色、调节细胞p H值和苹果酸含量、促进乙烯生物合成、调控叶片衰老和叶型等,但它是否影响苹果果实采后的贮藏性能尚不清楚。本文通过测定苹果果实采后贮藏期间相关指标的变化,探索了MdbHLH3对苹果果实采后贮藏性能的影响,对提高苹果果实的采后贮藏性能,延长贮藏时间以及选育耐贮藏品种提供了参考依据。本实验以皇家嘎啦野生型(WT)和MdbHLH3过量表达转基因苹果株系MdbHLH3-27、MdbHLH3-36、MdbHLH3-44的苹果果实为试材,在开花后120天采摘苹果果实,放于气调库中贮藏120 d,测定在贮藏期间苹果的贮藏性能。主要研究结果如下:1.贮藏期间,MdbHLH3转基因苹果中的果糖、葡萄糖、蔗糖、苹果酸和淀粉含量均比WT苹果的高,而维生素C(VC)含量则要比WT低。MdbHLH3转基因苹果果实的可溶性固形物(TSS)、可溶性糖和可滴定酸(TA)的含量以及糖酸比(TSS/TA)均高于WT。结果表明,与WT相比,MdbHLH3转基因苹果在采后贮藏期间的营养和风味品质更好。2.WT和MdbHLH3转基因苹果的果实硬度均呈现随贮藏时间的增加而减小的趋势,乙烯释放速率均呈现典型的呼吸跃变型果实的特征,呈现出先上升后下降的趋势。贮藏期间,MdbHLH3转基因苹果的果实硬度均比WT小,乙烯释放速率却相反,均比WT大。结果表明,与WT相比,MdbHLH3转基因苹果的贮藏性能较差。3.WT和MdbHLH3转基因苹果中的原果胶和纤维素(CLL)含量随贮藏时间的增加而减少,而水溶性果胶(WSP)的含量呈先升后降的趋势,在贮藏第60 d达到了峰值。MdbHLH3转基因苹果的原果胶和CLL含量要低于WT,而WSP含量则高于WT苹果。结果表明,MdbHLH3转基因苹果在采后贮藏过程中,果实的软化程度要高于WT,耐贮性比WT差。4.在贮藏期间WT和MdbHLH3转基因苹果中α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶(α-L-Af)、β-半乳糖苷酶(β-Gal)和多聚半乳糖醛酸酶(PG)这三种细胞壁降解酶的活性总体变化趋势相对一致,都呈先升后降的趋势,并且在贮藏的第60 d,酶活性到达峰值。MdbHLH3转基因苹果中α-L-Af,β-Gal和PG的活性均高于WT,这表明MdbHLH3转基因苹果的细胞壁降解能力要高于WT。5.WT和MdbHLH3转基因苹果中的丙二醛(MDA)含量均呈现随贮藏时间的增加而先升后降的趋势,在贮藏过程中,MdbHLH3转基因苹果的MDA含量均高于WT。结果表明,MdbHLH3转基因苹果果实在贮藏期间的膜质过氧化水平比WT高。6.WT和MdbHLH3转基因苹果中的超氧化物歧化酶(SOD)活性,在贮藏0-30 d,SOD活性急剧增加,在第30 d达到高峰,随后活性下降,逐渐稳定。过氧化物酶(POD)活性在贮藏期间呈先升后降的趋势,在贮藏第60 d,POD的活性到达峰值,随后缓慢下降,趋于稳定。在贮藏过程中,MdbHLH3转基因苹果中的SOD和POD活性均高于WT,这表明MdbHLH3转基因苹果的膜质过氧化程度要高于WT苹果。上述实验结果表明,在贮藏过程中,3个MdbHLH3转基因株系果实中果糖、葡萄糖、蔗糖、苹果酸和淀粉的含量始终高于WT。有趣的是,在果实贮藏过程中,TSS/TA也呈现出相同的趋势。此外,果实硬度随贮藏时间的延长而降低,MdbHLH3转基因苹果的果实硬度显著小于WT苹果。WT和MdbHLH3转基因苹果在采后贮藏120 d内,乙烯释放速率均呈现出先升后降的趋势,在贮藏第90 d到达峰值,但MdbHLH3转基因苹果的乙烯释放量均显著高于对照。MdbHLH3转基因果实中的WSP、CLL和MDA含量、抗氧化酶(SOD和POD)和细胞壁降解酶(α-L-Af,β-Gal和PG)活性均显著高于WT对照。本实验的研究结果揭示了MdbHLH3转录因子负向调控苹果的贮藏性能,缩短了苹果的贮藏时间。这为改善肉质果实的采后贮藏时间及分子辅助育种选育耐贮藏苹果品种提供了参考。
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