第一部分：稳定的菌株体系的建立。菌种保存时间过长或进行多次传代后，往往会出现菌种退化现象。菌种退化会造成孢子形成能力减弱、孢子量减少，对外界不良条件的抵抗力下降，生产能力下降等。在整个研究过程中，筛选高产菌株和防止菌种衰退是工作的重点之一。　　 目的：对我公司自主分离出来的一支Pneumocandin Bo菌株进行自然分离（纯种分离），以验证其原有生产能力。然后，对所分离的菌株采用多种方法进行诱变处理，筛选高产菌株。最后，用适当的方法进行保存，以保持遗传性状和生产能力的稳定。　　 方法：通过自然分离、紫外诱变、微波诱变、紫外复合He-Ne激光照射、紫外复合重铬酸钠、微波复合制霉菌素、原生质体法等对Pneumocandin B0菌株进行诱变处理，筛选高产菌株。将筛选得到的高产菌株用甘油管保藏。　　 结果：通过自然分离和上述各种方法诱变处理的综合应用，进行反复大量的筛选工作，得到的Pneumocandin Bo菌株PB-36-17。该菌株经摇瓶发酵培养后，经HPLC效价测定，大大地高于原始出发菌株，达到了预期效果。由此充分说明了大量的自然分离和诱变处理的可行性和实用性。　　 菌种保藏是使菌种处于休眠状态，停止代谢，以保持菌种长久存活和稳定，避免遗传变异和生产能力下降。保藏本Pneumocandin Bo菌株最方便、最经济的方法是甘油管保藏。　　 第二部分：种子培养条件的研究。种子由母瓶到子瓶传代培养实验主要是为以后罐上发酵作准备。传代培养的目的是用较少的斜面提供更大数量的代谢旺盛的种子，同时也可以减少斜面种子的使用量，减轻种子制备的压力。　　 目的：种子质量的好坏对发酵单位的影响很大。本章主要研究了种子生长过程中菌体形态的变化，确定了种子的培养时间和培养基成分，并对种子的扩大培养进行了探讨。　　 方法：通过对适用于Pneumocandin Bo菌株生长的碳源、氮源按照四因素三水平正交表的配比进行了考察；对种子传代培养条件、母瓶的培养、子瓶的培养、发酵的条件等进行单因素多条件的考察。　　 结果：确定了种子培养的最优培养基为，可溶性淀粉1.5％，蛋白胨0.3％，棉籽饼粉1％，葡萄糖0.1％，磷酸二氢钾0.05％，玉米浆1.5％，碳酸钙0.7％，pH为自然值。一般种龄44h最佳，当进行种子扩大培养时，接种量10％，一代种子培养时间为42h，二代种子培养时间为20h是最优的种子控制条件。　　 第三部分：发酵条件的研究。发酵条件的控制是直接影响到生产水平的重要因素。培养基的成分、发酵温度和pH都会对生产水平造成极大的影响。而对于棘白霉素Pneumocandin Bo菌株来说，培养基成分还可能会影响到产品的组分，直接影响到产品质量。　　 目的：优化发酵培养基，确定温度、pH和接种量等发酵条件，使高产菌株生产能力得以体现。　　 方法：应用正交实验确定发酵培养基成分，并应用均匀设计实验进一步优化；对培养基初始pH值、发酵温度、摇瓶装量、接种量、菌丝浓度等——考察确认；高产菌株上罐试验，确定发酵培养基、搅拌、氨氮等一系列条件。　　 结果：获得了发酵的优化条件，培养基成分为甘露醇5％，葡萄糖1.5％，棉籽饼粉4％，蛋白胨0.5％，磷酸二氢钾0.01％，硫酸镁0.1％，脯氨酸10mg/L，pH为5.6;发酵温度为25℃，摇瓶装量40mL，接种量10％，发酵周期为180h。在此优化条件下，摇瓶最后发酵单位可达到1300U/mL左右。确定了上罐条件，在实验罐上验证了该菌株的生产能力。　　 结论：Pneumocandin Bo菌株筛选和发酵工艺参数明确，工艺简便、合理，产品含量高，初步表明了本菌种具备了扩大生产的能力。在廉价原材料如麸质粉的合理使用，补料工艺的研究和合理调控，pH和溶氧的控制等问题上，需要进一步开展深入的研究。