生物荧光分析试剂Cy5的合成及薯蓣皂素酶解法提取工艺的研究

来源 :陕西师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiazixu
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该论文首先综述了Cy系列试剂在生物荧光分析中作为分子灯标和在蛋白质组学中的应用原理,在分子灯标中,Cy系列作为荧光基团标记在一段寡聚核苷酸序列的一端,在另一端标记荧光淬灭基团,当在原性状态下呈环-茎结构,荧光基团和淬灭基团相互靠近,发生荧光共振能量转移而无荧光,当核苷酸与靶基因特异性结合后会发出荧光可用来检测.而在蛋白质组学中,Cy系列与蛋白质结合,通过一定的分离手段分离后,利用荧光可检测,从而研究蛋白质组的一系列性质.接下来列举了一系列的具体实例,阐述了Cy系列在生物分析中的广泛应用.此外还对Cy系列试剂在其他领域的应用作了简单的介绍.最后,鉴于菁染料的广泛用途和应用前景,我们以Cy5为例探讨生物荧光分析试剂Cy系列的合成研究.我们从最基本的原料对氨基苯磺酸开始,经过重氮化反应,吲哚环的成环反应,亲核取代反应,缩合反应等五步反应得到了制备Cy5的两个原料:1-乙基-2,3,3-三甲基吲哚-5-磺酸盐和1-(ε-羧戊基)-2,3,3-三甲基吲哚-5-磺酸盐.并利用缩合剂β-苯胺基丙烯醛缩苯胺盐酸盐对二者进行了初步的交联,得到了一些进行Cy5合成的重要条件.为了使人工栽培黄姜为原料生产薯蓣皂素的收率得以提高,该文的第二部分采用正交实验的方法研究了以人工栽培黄姜为原料利用酶解法的提取工艺,最终得到最佳工艺为:150g黄姜在350mL水、3.OmL淀粉酶、40℃下酶解12小时.水解后再用石油醚提取薯蓣皂素,收率可达2.37%,与直接酸水解法的得率1.84%相比有较大幅度的提高,这将为实际生产提供有价值的指导.
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