人绒毛膜癌是恶性滋养叶细胞肿瘤，常发生在正常妊娠或者异常妊娠后，病变部位主要位于子宫，具有高转移和高侵袭能力，并易通过血行转移到全身，恶性程度极高。因此，研究绒毛膜癌的转移机制并寻求有效的靶点抑制其转移将有助于肿瘤的防治。目前，对肿瘤转移能力的研究逐渐集中在蛋白翻译后修饰，尤其是糖基化修饰，它是在各种糖基转移酶的催化下，于各功能蛋白上添加相应的糖链，而不同的糖残基对蛋白功能的影响也不尽相同，从而调控各种生物学效应。本研究则主要探讨了氧连接N-乙酰葡萄糖胺（O-linkedN-acetylglucosamine，O-GlcNAc）单糖修饰对绒毛膜癌细胞迁移能力的影响及其机制。O-G1cNAc单糖修饰是普遍存在于细胞质、核内的一种蛋白翻译后修饰方式，发生于蛋白结构的丝氨酸(Ser)及苏氨酸(Thr)残基的侧链羟基上。它在O位-β-N-乙酰葡萄糖胺基转移酶（OGT）的作用下仅将一个N-乙酰氨基葡萄糖转移到蛋白的Ser/Thr残基上，并可以通过糖苷酶OGA移除糖链，在两个酶的共同作用下保持O-G1cNAc单糖修饰的动态平衡。一些与粘附相关的功能蛋白的O糖基化修饰往往会对其自身活性和功能造成不同的影响，进而改变细胞的生物学功能，如细胞迁移、粘附、侵袭等。本研究采用人绒毛膜癌细胞（JAR）为研究模型，首先采用OGA特异性抑制剂处理细胞，建立O-G1cNAc糖基化高表达的细胞模型，随后进行细胞迁移实验（transwell方法）观察JAR细胞迁移能力是否受到影响。初步研究发现，O-G1cNAc蛋白糖基化修饰水平增加促进了JAR细胞的迁移，进一步通过粘附实验证实JAR细胞与脐静脉血管内皮细胞EA.hy926的粘附能力也相应增强了。说明O-G1cNAc蛋白糖基化修程度与绒毛膜癌的迁移和转移有关。接着，通过siRNA干扰，建立了OGT基因部分沉默的细胞模型，同样采取transwell及粘附实验证实O-G1cNAc蛋白糖基化水平与JAR细胞迁移及粘附能力呈正相关。采用免疫共沉淀技术，发现OGA抑制剂处理JAR细胞后，伴随着胞内O-G1cNAc糖基化整体水平的增加，细胞内重要的功能蛋白β-catenin发生O-GlcNAc糖基化修饰的程度也相应上升，但并未影响到β-catenin在绒毛膜癌细胞内的蛋白表达量。此外，我们用IL-8(100ng/ml)处理绒毛膜癌细胞24小时后，通过荧光定量PCR、western blot方法检测细胞内的OGT及O-G1cNAc糖基化修饰程度，结果显示OGT无论是RNA转录水平还是蛋白翻译水平均无明显改变，胞内O-G1cNAc糖基化整体水平亦无变化，说明O-GlcNAc蛋白糖基化修饰并不参与IL-8促进绒毛膜癌细胞转移的调控过程。综上， OGT可能通过增加β-catenin的O-GlcNAc糖基化水平促进绒毛膜癌细胞的转移及与内皮细胞的粘附，这可能也是绒毛膜癌高转移性的分子机制之一。本研究为临床上绒毛膜癌的防治提供了新的靶点及研究思路。