石榴皮总黄酮的提取及抗氧化活性和抑菌作用研究

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《本草纲目》中记载:石榴皮是石榴科植物石榴的果皮,鲜、干品均可用,具收敛止泻作用,临床常用于久泻、久痢、脱肛、下血及崩中、带下等。自由基对细胞和组织的损伤是其致病的基础,通过抑制自由基的产生,或直接清除自由基,可以达到减少疾病产生的可能、起到抗衰老的目的。人体自身内源性自由基清除系统可以清除体内多余自由基,但毕竟有限,更多的是发掘外源性抗氧化剂——自由基清除剂,阻断自由基对人体的入侵。通过体外抑菌作用试验,可以评价其抑菌性能、抗菌性,提供抗菌药物的最基本的药效学数据。本研究对石榴皮黄酮类化合物的微波辅助提取方法及抗氧化、体外抑菌作用进行了研究,分为以下三部分进行:1、石榴皮总黄酮微波辅助提取条件的优化目的本实验以总黄酮含量为依据,对石榴皮总黄酮微波辅助提取方法进行优化。方法以芦丁为标准品用分光光度法,采用乙醇提取微波辅助法,通过单因素和L9(43)正交试验,优选了提取参数。结果对提取效果影响因素依次为料液比>乙醇体积分数>微波功率>提取时间。最佳提取工艺条件是:乙醇浓度90%,微波功率140W,提取时间60s,料液比1:15。黄酮得率:6.64±0.032%。单独用乙醇回流法黄酮得率为:5.01±0.02%。结论微波辅助提取法提取出的石榴皮总黄酮得率高于乙醇回流法。2、石榴皮总黄酮提取物的体外抗氧化作用研究目的通过抗氧化活性的测定来检验石榴皮提取物体外抗氧化活性。方法羟自由基(·OH)的清除活性、对超氧阴离子自由基(O2-·)的清除活性、对DPPH·的清除活性,以及对小鼠肝组织脂质过氧化的抑制作用。结果微波辅助提取法提取液的IC50分别为:512.2mg/mL、48.8mg/mL、629.0mg/mL、57.5mg/mL,与乙醇法提取液比较,除对小鼠肝组织脂质过氧化的抑制作用强于微波辅助法提取物,其他三项测试都显示,微波辅助法提取物清除自由基能力强于乙醇回流法。结论石榴皮提取物对三种自由基、一种脂质过氧化均都有一定抑制清除作用。其中,对超氧阴离子自由基(O2-·)的清除作用最强。微波辅助法能更好的保护提取物抗氧化活性。3、石榴皮总黄酮提取物的的抑菌作用研究目的通过抑菌实验,测定石榴皮提取物的最低抑菌浓度,以评价其抑菌性能,证明其抗菌性。方法本实验采用滤纸片法、最小抑菌浓度法测定了石榴皮提取液对大肠杆菌、枯草杆菌、变形杆菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌的抑菌圈直径和最小抑菌浓度(MIC)。结果对5种细菌的抑菌圈直径分别为1.0cm、1.0cm、1.0cm、1.1cm、1.2cm、0.8cm。最小抑菌浓度(MIC)实验结果显示:大肠杆菌最小抑菌浓度为0.5g/mL;枯草杆菌的MIC为1g/mL;变形杆菌的MIC为1.5g/mL;金黄色葡萄球菌的MIC为0.25g/mL;蜡状芽孢杆菌的MIC为2g/mL。结论石榴皮对这五种菌体均有不同程度的抑制作用,证明石榴皮提取液具有抗菌性,本次抑菌圈试验和最小抑菌浓度(MIC)试验都显示。
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