研究背景：中枢神经的不可再生已经成为共识,因此寻找其他可以修复或替代的方法成为当下研究的热点。在发达国家,脊髓损伤的发生率大约为13.3～45.9人/百万人／年；据不完全统计,在中国每年大约新增一万左右的脊髓损伤患者。在损失大量社会劳动力的同时,医疗费用支出也成为社会和家庭的巨大负担。近年来,随着细胞工程技术的发展,细胞移植治疗脊髓损伤成为研究的热点。神经干细胞、成纤维细胞、嗅鞘细胞、巨噬细胞等在修复脊髓损伤方面取得了一定的疗效,但是尚不能满足我们的需要。寻找更好的种子细胞,成为治疗脊髓损伤有可能取得重大突破的途径之一。骨髓间充质干细胞(BMSCs)自发现以来,,大量的试验充分证明其在体外向结缔组织包括骨、软骨、骨骼肌、脂肪、韧带等方面的分化能力。Kopen等报道将骨髓间充质干细胞注入新生鼠侧脑室后,最终分化成为了神经胶质细胞。骨髓间充质干细胞开始用于脊髓损伤的治疗。但单纯的骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤疗效有限。Abouelfetouh等人将骨髓间充质干细胞在体外与海马组织薄片共培养,最终分化成为了神经细胞。本实验采用生物诱导和化学诱导两种方法,对骨髓间充质干细胞进行定向诱导,最终使其分化为能够表达神经细胞特异性标志的类神经细胞,将诱导后的类神经细胞移植入制备好的脊髓损伤的动物模型中。通过对模型动物肢体的运动功能恢复情况和脊髓切片组织学变化的观察,研究骨髓间充质干细胞在定向诱导分化为神经细胞后,移植治疗脊髓损伤的效果。该实验为临床上采用骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤提供理论依据。研究目的：通过对脊髓损伤模型大鼠的行为对比及生化指标的检测,研究骨髓间充质干细胞诱导分化为类神经细胞后移植对脊髓损伤的疗效。研究方法：取4W雄性Wistar大鼠骨髓分离培养骨髓间充质干细胞,对第三代骨髓间充质干细胞分别进行化学诱导和生物因子诱导后,收集备用。8W雄性Wistar大鼠48只,采用Allens打击法建立大鼠的脊髓损伤模型,随机分为四组：骨髓间充质干细胞组、化学诱导组、生物诱导组和DMEM培养液组,一周后骨髓间充质干细胞组损伤部位局部注射第三代骨髓间充质干细胞,化学诱导组局部注射化学诱导成的神经细胞,生物诱导组局部注射生物诱导成的神经细胞,DMEM培养液组局部注射细胞培养液。对48只大鼠脊髓损伤模型分别于伤后1、2、3、4、6、8、10、12周进行BBB评分,并于第12周末对损伤部位进行取材做组织切片,观察脊髓损伤的修复情况。研究结果：模型建立后12周,骨髓间充质干细胞组、化学诱导组和生物诱导组大鼠后肢功能恢复明显优于DMEM培养液组,且统计学有显著差异(P＜0.05),骨髓间充质干细胞组和化学诱导组功能恢复无明显差别(P=0.4363),生物诱导组恢复效果好于前两组,且统计学有显著差异(P＜0.05)。脊髓组织切片HE染色显示骨髓间充质干细胞组和化学诱导组近似,脊髓胶质细胞增生,神经细胞崩解、空洞形成少于DMEM培养液组,生物诱导组神经损伤修复效果最佳。研究结论：1.化学诱导和生物诱导两种方案都能诱导骨髓间充质干细胞分化为类神经细胞,表达神经细胞特异性标志。2.单纯骨髓间充质干细胞和两种方案定向诱导分化为的类神经细胞移植都能促进脊髓损伤的恢复。3.采用生物诱导法将骨髓间充质干细胞诱导分化为类神经细胞后移植治疗脊髓损伤效果明显优于单纯组和化学诱导组。