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缺血性心血管疾病是严重威胁人类健康的疾病之一。心肌重构是缺血性心血管疾病发展过程中重要的组织结构和功能改变,其成因往往涉及诸多因素：心肌细胞的凋亡、细胞外基质结构与组成成分改变、胶原聚集等。心肌重构最终可发展为心衰并易发严重心血管事件。在药物、介入、外科等治疗方法效果欠佳的情况下,干细胞移植为心血管疾病的治疗带来了希望并得到越来越多的关注。骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)是具有多向分化潜能的骨髓干细胞。研究表明MSCs能够分化成软骨细胞、成骨细胞、肌细胞、脂肪细胞等。MSCs移植是近年来发展迅速且颇具前景的治疗缺血性心脏病的手段。有研究发现,MSCs除了通过向心肌细胞、血管内皮细胞、平滑肌细胞等分化重建血供,抑制心室重构等外,其改善心功能的途径很可能甚至是主要通过旁分泌作用：分泌多种细胞因子保护心脏,促进血管生成,减少心肌细胞凋亡和瘢痕形成。MSCs移植后心功能短时间内得到改善以及条件培养液的保护作用也进一步突显出旁分泌作用的重要性。因此,增强MSCs的旁分泌能力是提高其心肌保护作用的重要途径。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)是MSCs分泌的多种细胞因子之一。有研究发现,高表达VEGF的MSCs其损伤修复及组织保护能力提高。VEGF作为内皮细胞的强促有丝分裂剂,不仅参与血管再生过程,还通过改善病变部位血供来减少心肌细胞和内皮细胞的凋亡。肾素-血管紧张素系统(RAs)不仅存在于循环系统,还广泛存在于多种局部组织,例如心、脑、肾。血管紧张素II(AngiotensinⅡ, AngⅡ)作为RAS中最重要的效应多肽在心肌组织中以自分泌或旁分泌的形式作用于心肌细胞本身或周围组织,并参与心脏的多种生理和病理过程,例如控制血浆容量,调节电解质平衡和血压。现有研究发现,AngⅡ也是一种促血管生成因子,它能够调节多种促血管生成活动,包括促进VEGF的转录,调节血管平滑肌细胞和内皮细胞的增殖。本课题组之前已证明AngⅡ刺激能够激活MSCs的Akt和ERK1/2通路,进而增强MSCs分泌VEGF的能力。然而在此过程中是否有其他信号通路参与还未见报道。目的探讨MSCs中ACE, HIF-1α和STAT3磷酸化在AngⅡ诱导的VEGF合成中的作用,并分析AngⅡ刺激下ACE, HIF-1α和STAT3磷酸化之间的关系。方法分离培养大鼠MSCs,对细胞以AngⅡ处理,并用ACE抑制剂卡托普利(captopril)、针对HIF-1α或STAT3的小干扰RNA(siRNA)进行干预。用免疫印迹法(Western blot)检测细胞内ACE和HIF-1α的蛋白水平以及STAT3磷酸化(phosphoryed STAT3, pSTAT3)水平；应用Real-time PCR法检测细胞内VEGF mRNA以及ACE mRNA水平的变化。用ELISA法检测培养液中VEGF蛋白水平的变化。结果1)AngⅡ促进了MSCs中HIF-1α和ACE的表达以及STAT3的磷酸化；2)Captopril, HIF-1αsiRNA和STAT3siRNA明显阻断了AngⅡ诱导增加的VEGF表达和分泌；3)Captopril抑制了AngⅡ诱导增加的HIF-1α,pSTAT3水平；4) HIF-1αsiRNA和STAT3siRNA阻断了AngⅡ诱导增加的ACE表达。结论ACE, HIF-1α和pSTAT3参与了AngⅡ诱导的VEGF合成,并且ACE和HIF-1α、ACE和STAT3磷酸化之间存在着相互促进的关系。