抗人肝癌单链抗体基因的克隆表达及活性鉴定

来源 :第四军医大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:kf_haiyang
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基因工程抗体的研究带动了肝癌导向治疗的发展,近年来已有不少鼠源性抗肝癌单克隆抗体或抗体片段用于肝癌的珍断及免疫治疗,显现了在肝癌诊断及治疗上的潜质。但鼠源性单抗的免疫原性限制了它的临床应用,而基因工程抗体可以克服鼠源性单抗的主要缺点,显示了良好的应用前景。本文的目的就是克隆抗肝癌单链抗体的基因,在大肠杆菌中进行表达,获得具有肝癌特异结合活性的单链抗体,为其在治疗上的应用打下基础。 本文采用RT-PCR方法从可分泌抗人肝癌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞HAb18中克隆出抗体可变区基因,所克隆重轻链基因分别长363bp和342bp,基因内无终止码,为开放读框,分别编码121个和113个氨基酸,含三个CDR区和四个FR区,并含有维持抗体结构所必需的两个半胱氨酸。计算机网上(blast)分析与已发表的小鼠抗体可变区基因有较高同源性。表明所克隆基因为功能性重排的小鼠抗体可变区基因。
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