【摘 要】
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本研究主要探究视黄酸（Retinoic acid,RA）对笼养应激蛋鸭小肠黏膜损伤的影响,具体包括以下两部分:试验一:本试验旨在研究蛋鸭笼养初期的应激反应对蛋鸭小肠黏膜损伤的影响。试验选用64只70日龄,平均初始体重为（1±0.1）kg的麻鸭,根据体重按完全随机区组设计分到平养组（TB）与笼养组（CR）,每组4个重复,每个重复8只鸭,整个试验共持续10天,屠宰体重在1.25kg左右。结果表明:TB
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本研究主要探究视黄酸（Retinoic acid,RA）对笼养应激蛋鸭小肠黏膜损伤的影响,具体包括以下两部分:试验一:本试验旨在研究蛋鸭笼养初期的应激反应对蛋鸭小肠黏膜损伤的影响。试验选用64只70日龄,平均初始体重为（1±0.1）kg的麻鸭,根据体重按完全随机区组设计分到平养组（TB）与笼养组（CR）,每组4个重复,每个重复8只鸭,整个试验共持续10天,屠宰体重在1.25kg左右。结果表明:TB组与CR组相比,血清肠道屏障损伤指标内毒素、二胺氧化酶与D-乳酸含量显著降低（P＜0.05）;血清氧化应激指标过氧化氢酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶与总抗氧化能力含量显著升高（P＜0.05）;血清氧化应激标志物丙二醛含量显著降低（P＜0.05）;肠道紧密连接蛋白ZO-1、Claudin-1与Occludin3的m RNA表达量显著升高（P＜0.05）。小肠组织病理切片结果显示,CR组与TB组相比,出现肠绒毛断裂等结构性损伤,且绒毛高度显著降低（P＜0.05）,隐窝深度显著增加（P＜0.05）。RNA-seq结果表明CR与TB两组间的差异基因主要集中在与氧化应激密切相关的PPAR、MAPK信号通路上,我们对氧化应激标志及因PPARγ、Nrf2与HO-1进行了荧光定量PCR检测,结果表明CR组Nrf2与HO-1的m RNA表达量显著高于TB组,PPARγ的m RNA表达量显著低于TB组。综上分析,蛋鸭在上笼初期会产生氧化应激,导致蛋鸭肠道屏障功能损伤。试验二:本试验旨在研究视黄酸对笼养应激所导致的肠屏障损伤的影响及探究视黄酸在饲粮中的最适添加浓度。试验选用160只70日龄,平均初始体重为（1±0.1）kg的麻鸭根据体重按完全随机区组设计分为5组,每组4个重复,每个重复8只鸭,分别饲喂在基础饲粮中添加0、2500、5000、7500和10000 IU RA/kg的试验饲粮,整个试验共持续10天,屠宰体重在1.25kg左右。结果表明:随着RA浓度的增加,肠道绒毛高度有上升趋势,其中TG2、TG3和TG4组肠绒毛高度显著高于CR组（P＜0.01）;TG2与TG3组的隐窝深度显著低于CR组（P＜0.01）。TG2组血清二胺氧化酶和D-乳酸浓度显著降低（P＜0.05）。血清超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、总抗氧化能力和谷胱甘肽过氧化物酶浓度显著升高（P＜0.05）;血清丙二醛浓度显著降低（P＜0.05）。实时荧光定量PCR结果显示,TG2组ZO-1、occludin-3和Claudin-1基因表达显著升高（P＜0.05）。RNA-seq结果提示视黄酸处理可能在内质网应激（endoplasmic reticulum stress,ERS）和细胞凋亡中发挥作用。我们选择ERS标记基因（CHOP、GRP78、HSPA8和HSP90B1）和凋亡标记基因（IP3R、BCL-2和CASP3）进行q PCR验证,验证结果显示5000IU RA可显著降低ERS标记基因和凋亡标记基因的表达（P＜0.05）。综上所述,饲粮中添加5000 IU/kg RA可有效缓解早期笼内肠道屏障功能障碍。其机制可能与5000IU/kg RA延缓肠上皮细胞凋亡有关。总体结论:蛋鸭上笼初期会产生氧化应激,导致肠道屏障损伤,而添加5000IU RA可有效缓解氧化应激所导致的肠屏障损伤。
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