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赭曲霉毒素(OT)是由曲霉属和青霉属中的某些菌种产生的有毒代谢产物,是异香豆素联结L-苯丙氨酸在分子结构上类似的一组化合物。赭曲霉毒素(OT)主要包括赭曲霉毒素A(OA)、赭曲霉毒素B(OB)、赭曲霉毒素C(OC)、赭曲霉毒素D(OD)等七种,其中以OA为主,OA的毒性最强、污染最为严重、分布最为广泛。OA主要由纯绿青霉、赭曲霉和碳黑曲霉三种真菌产生。主要危及人和动物的肾脏,动物实验表明:OA是一种具有强烈肾脏毒性和肝脏毒性的真菌毒素,并具有致癌、致突变、致畸、神经毒性和免疫抑制等毒性。在目前己知的真菌毒素家族中,根据其重要性及危害性,OA被认为是仅次于黄曲霉毒素而列于第二位;1993年,国际癌症研究机构(IARC)将其定为ⅡB类致癌物(人类可能的致癌物)。联合国粮农组织(FAO)、世界卫生组织食品添加剂联合专家委员会(WHOJECFA)及欧盟等国家都对OA进行了深入的大量的研究,调查并评价了OA在多类食品中的污染水平及本国居民对OA膳食暴露量,制定了食品中OA的相关法规和最大允许限量值,以保护本国居民的身体健康。OA主要污染粮谷类食品、动物组织、咖啡、牛奶、酒类等产品;谷类粮食是人类膳食摄入赭曲霉毒素的一类主要来源,另根据欧洲的调查结果,食品添加剂和污染物法典委员会(CCFAC)指出酒类是仅次于谷类是人类膳食摄入赭曲霉毒素的又一主要来源;我国是农产品大国而且饮食传统是以谷类粮食食品为主,而且我国又是酒类的消耗大国,OA对我国居民的身体健康可能构成潜在性危害,因此应加强谷类粮食和酒类中OA的检测,了解OA每日可能的摄入量。食品添加剂和污染物法典委员会(CCFAC)对小麦、大麦等谷类及其相关产品中赭曲霉毒素A的限量为要低于5μg/kg。而我国现行的国家标准方法是薄层色谱法(TLC),其最低检出量为10μg/kg,显然薄层色谱法已不适用于我国的OA污染水平检测。我国对于赭曲霉毒素的研究尚在起步阶段,对OA的研究还比较少,还没有OA的污染水平和人群中OA的膳食摄入量的研究,因此,本研究建立了一种简单、可靠、灵敏的OA检测方法,并成功地应用于河北省食管癌高发区磁县的小麦和市售啤酒中OA的检测分析。
目的:分别研究反相高效液相色谱法检测小麦和啤酒样品中赭曲霉毒素A的方法;并用该方法对河北省食管癌高发区磁县的小麦和某市市售啤酒中OA的污染情况进行检测。
方法:30份小麦样品在食管癌高发区河北省磁县随机采集,35份啤酒样品采自某市零售市场和超市。样品中OA经过提取后,经C<,18>固相萃取小柱净化,净化液用反相BDS C<,18>柱(250×4.6mm)高效液相色谱法分离,以乙腈∶水∶乙酸(99∶99∶2,v/v/v)作为流动相,用荧光检测器(激发波长为333nm,发射波长为460nm)检测样品中的OA含量,样品和标准品比较,根据保留时间定性和峰面积定量。
结论:研究了采用C<,18>固相萃取小柱净化、用荧光检测器检测小麦和啤酒样品中赭曲霉毒素A的高效液相色谱法(HPLC),该方法简便、比较准确可靠,灵敏度较高,本实验的准确度、精密度均较好,检出限也较低;用本方法对样品测定结果提示啤酒中赭曲霉毒素A污染水平比较低,而在肿瘤高发区小麦中OA的污染率及污染水平明显较高。