组蛋白去甲基化酶JARID1A对人子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖的影响及其作用机制研究

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目的探讨组蛋白去甲基化酶JARID1A对人子宫内膜癌细胞体外增殖的影响,及其作用机制,旨在为子宫内膜癌基因治疗提供新的靶点。方法1.组蛋白去甲基化酶JARID1A对人子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖的影响。设计针对JARID1A基因的siRNA转染Ishikawa细胞;MTT及流式细胞术检测转染siRNA后,细胞的增殖及周期情况。2. JARID1A抑制子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖的机制研究。采用实时荧光定量RT-PCR和Western-blot检测转染JARID1A siRNA对Ishikawa细胞中PR表达的影响;脂质体介导法将真核表达质粒pCMV-HA-JARID1A和空载体pCMV-HA转染Ishikawa细胞,同时设空白对照,RT-PCR和Western-blot检测各组细胞中PR表达;采用ChIP-PCR技术检测转染JARID1A siRNA,Ishikawa细胞中H3K4me3水平变化。结果1.转染JARID1A siRNA48h后, Ishikawa细胞增殖受到抑制,细胞被阻滞于G1期,由G1期向S期进展延缓(P<0.05)。2.转染JARID1A siRNA增强Ishikawa细胞中PR基因表达(P<0.05);转染质粒pCMV-HA-JARID1A抑制PR基因表达(P<0.05);转染JARID1A siRNA增强Ishikawa细胞中PR基因启动子ERE区H3K4me3水平(P<0.05)。结论1. JARID1A siRNA通过增强人子宫内膜癌Ishikawa细胞中PR启动子ERE区H3K4me3水平,增强PR表达,抑制子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖。2. JARID1A有望成为子宫内膜癌基因治疗的新靶点。
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