【摘 要】
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测定头发中类固醇物质水平越来越多被应用于临床、神经内分泌和慢性应激等研究领域。其中,皮质醇、可的松、脱氢表雄酮(DHEA)、孕酮和睾酮等5种类固醇激素对人类的认知、记忆
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测定头发中类固醇物质水平越来越多被应用于临床、神经内分泌和慢性应激等研究领域。其中,皮质醇、可的松、脱氢表雄酮(DHEA)、孕酮和睾酮等5种类固醇激素对人类的认知、记忆和情绪等有重要作用。 本研究建立了一种灵敏、可靠、可同时测定头发中上述五种类固醇激素的高效液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)。样品处理方法为:近头皮、长度为1厘米的30mg发段经剪碎后加入一定浓度的五种物质的内标溶液,在甲醇中室温孵育24小时;再将离心后的孵育液经过C18固相萃取柱进行除杂、富集,然后经过20倍浓缩进入LC-MS/MS系统进行检测和定量。检测在大气压化学电离(APCI)正离子多反应模式(MRM)下进行。前处理过程中固相萃取技术的使用有效的降低了基质效应的影响。该方法的线性范围符合头发中物质的含量范围;方法的定量限可达到0.5 pg/mg(皮质醇、可的松和睾酮)、1 pg/mg(孕酮)和2.5 pg/mg(DHEA);日内、日间精密度在10%以内;五种物质的加标回收率在96-103%。 将该方法应用于324名高一学生(男生133名,女生191名)和229名大一男生,测定两组人群头发样本中的上述五种类固醇含量。结果显示,高一男生可的松和睾酮含量显著高于女生(p<0.05);高一男生可的松含量显著高于大一男生(p<0.001),而睾酮含量则相反(p<0.05)。中/重度抑郁的大一男生,其皮质醇和可的松含量均著高于非抑郁人群(p<0.05),而DHEA含量则相反(p<0.05);同时,中/重度抑郁组的可的松含量显著高于轻度抑郁组(p<0.05)。
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