肥胖是现今危害人们身体健康的主要原因之一,肥胖导致体内脂肪的大量合成,但代谢较慢,使人容易患上慢性代谢性疾病。哺乳动物体内储能的白色脂肪在一定条件下可转化为耗能的棕色脂肪进而增强脂肪代谢,缓解肥胖类疾病症状,但白色脂肪棕色化的作用机理仍不明确。为了解DLGAP1基因对白色脂肪棕色化的影响,本研究通过在体外培养的脂肪细胞中过表达或敲除该基因来探讨其在白色脂肪棕色化中的作用。本研究首先检测DLGAP1基因在小鼠白色脂肪和在棕色脂肪中的表达差异,发现该基因在白色脂肪中表达量明显高于棕色脂肪。接着构建DLGAP1过表达载体并将其转染到体外培养的棕色脂肪细胞中,利用实时定量PCR、Western Blot、免疫荧光等生物学技术检测脂肪细胞中相关基因表达的变化及DLGAP1过表达对棕色脂肪细胞增殖、凋亡及成脂诱导的影响。结果发现,DLGAP1过表达使得棕色脂肪细胞中白色脂肪特异性标记基因ASC1、LEP、FASN、SCD表达升高;棕色脂肪标记基因UCP1、ADRA1A、PGC1ɑ、CIDEA的表达下降。且DLGAP1过表达会抑制棕色脂肪细胞增殖,促进其凋亡,并可抑制棕色脂肪细胞内形成小脂滴聚落。最后,构建DLGAP1基因CRISPR/Cas9敲除载体,并将其转染到体外培养的白色脂肪细胞中,利用实时定量PCR、Western Blot、免疫荧光等生物学技术检测白色脂肪细胞中相关基因表达的变化及DLGAP1敲除对脂肪细胞增殖、凋亡、成脂诱导的影响。结果发现,DLGAP1敲除使得白色脂肪细胞中白色脂肪特异性标记基因ASC1、LEP、FASN、SCD表达下降;棕色脂肪标记基因UCP1、ADRA1A、PGC1ɑ、CIDEA的表达上升。DLGAP1敲除对白色脂肪细胞增殖无明显作用,对其凋亡起到抑制作用,并促进白色脂肪细胞形成具有棕色脂肪细胞特性的聚集在一起的小脂滴。以上研究结果均证实DLGAP1可负调控小鼠白色脂肪棕色化。