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本研究包括两个部分：第一部分为培养基的比较和优化。选取费氏中华根瘤菌（Sinorhizobium fredii）HNO1和大豆慢生根瘤菌（Bradyrhizobium japonicum）USDA110为代表菌，进行培养基的比较试验。从YMA、TY、SM、PA和豆芽汁等5种培养基中，筛选出适合根瘤菌生长发酵，又成本低廉的培养基。用UV7501分光光度计测定HNO1和USDA110在供试培养基中生长的OD值，绘制OD值曲线。结果表明：HNO1在TY、YMA、豆芽汁培养基中的生长速度相近，均明显高于在PA和SM中的生长速度。USDA110在豆芽汁中生长速度最快，其次是TY和YMA，在YMA中生长较慢，在SM中的生长速度很低。 本研究进一步绘制了HNO1和USDA110在TY和BSE中的生长曲线，计算结果表明：HNO1在BSE中生长的代时为2.4小时，在TY中生长的代时为3.3小时，HNO1在BSE中生长速度更快，活菌数更多。USDA110在TY和BSE中生长的代时分别为7.8小时和6小时。USDA110在BSE中生长速度更快，活菌数更多，BSE更适合作为发酵培养USDA110的培养基。 由于USDA110在YMA中的生长速度太低，进一步对YMA培养基进行了优化。首先测定了USDA110在不同碳源中的生长速度。结果表明USDA110在葡萄糖中的生长速度远快于在其它供试碳源中的生长速度。培养52小时后，USDA110在葡萄糖中的OD值达到1.05，在甘露醇中却只有0.68。在乳糖为碳源时的生长速度最慢。以葡萄糖作为进一步优化的碳源，进行了L9（34）正交优化试验，方差分析结果表明，葡萄糖和酵母粉对USDA110生长的影响达极显著水平，K2HPO4和MgSO4·7H2O影响较小。优化培养基配方为：葡萄糖15g，酵母粉4g，K2HPO40.5g，MgSO4·7H2O 0.2g，NaCl 0.1g，CaCl2 0.05g，Rh微量元素液4ml，dH2O 996ml。进一步验证了USDA110优化培养基与3号培养基和YMA中的生长速度，证实优化培养基的效果与3号培养基的效果相当，都优于YMA。 第二部分为根瘤菌剂型的比较与优化。本研究制作了代表菌HN01和USDA110的固体、浓缩液体与冻干菌剂，并比较其在贮存过程中的存活率。固体菌剂制作了草炭、珍珠岩和蛭石三种剂型，室温下保存，定期取样，作稀释平板测数。结果表明：在草炭菌剂中，HN01前15天增长较快，菌数达到初始菌数的4.5倍以上，以后菌数开始下降，一个月后菌数下降到起始水平，前三个月的存活率较高，超过三个月后，死亡率加快。USDA110在草炭中的增长速度较慢，但是持续时间较长，一个月后达到初始菌数的1.5倍左右，到2个月后，菌数下降到起始水平，死亡速度也较HN01缓慢。在供试3种载体中，草炭要优于蛙石，蛙石又优于珍珠岩。 利用离心法制作浓缩液体菌剂，测定其存活率。结果表明:在4℃储存6个月后，USDAllo还有10/耐亿以上的活菌数，HN01还有20亿/m1以上的活菌数。HN01保存四个月后液体1和液体2的存活率分别为9.4%、9.6%，五个月之后存活率分别为5%和5.4%。USDAllo保存四个月后液体1和液体2的存活率分别为12.2%和 n.7%，5个月之后存活率只有4%左右，所以液体剂型可以保存3一4个月。氮气或真空对存活率的影响没有明显的差别，液体剂型很有发展前景。 冻干菌剂的研究结果表明:两种供试菌都在一20℃下保存最好，4℃下保存比一20℃要差，但均优于室温保存。供试菌在制作冻干菌剂的过程中死亡率较高，HN01经常规冻干后的存活率为18.5%，液氮冻干后菌的存活率为33.9%。USDAllO常规冻干后的存活率为22%，液氮冻干后的存活率为32.6%。由于制作过程中大量的菌被冻死，冻干菌剂存活率并不高。HN01在一20℃下保存3个月后，存活字分别为8.5%和8.9%，USDAllo分别为3.8%和6.6%。供试菌在室温下保存7天后，活菌数快速降低，HN01和USDAllo常规冻干剂型分别降为67x10‘和2.9xl0，个活菌数/g，液氮冻干剂型降为64 x106和8.5xl0，个活菌数/g，6个月后HN01和usDAllo常规冻干剂型分别降为48 xlo‘和O个活菌数/g，液氮冻干剂型降为2.7 xl旷和0.83 x10弓个活菌数/g。因此，冻干菌剂不宜作为生产根瘤菌剂的剂型，仅可作为菌种保藏之用。