大鼠动脉粥样硬化模型TLR6的表达及瑞舒伐他汀干预后的影响研究

来源 :湖南师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liujj08
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目的:本实验采用SD(Sprague dawley)大鼠动脉粥样硬化模型,应用HE染色、免疫组化蛋白定量、RT-PCR检测等方法,观察动脉粥样硬化大鼠胸主动脉中TLR6(Toll-like receptors6,TLR6)的表达情况。初步研究并探讨瑞舒伐他汀对TLR6的表达变化的作用和对动脉粥样硬化的影响。方法:本实验共选择36只雄性SD大鼠,平均6-8周龄,体重约180g-200g,先使用普通饲料顺应性喂养7天,然后采取随机抽签的方法将36只大鼠分为两组,分别为:对照组(n=12)和实验组(n=24)。实验组予以高脂饲料喂养,然后在其基础上予以维生素D3肌注+尼古丁灌胃,第4周后,将实验组24只大鼠再随机分为模型组(n=12)和药物组(n=12),模型组和药物组大鼠继续每日使用高脂饲料喂养。同时,在高脂饲料饲喂的基础上,模型组加用1ml生理盐水对大鼠进行灌胃,连续4周,药物组则给予同等剂量的瑞舒伐他汀(5mg/kg/d)对大鼠进行灌胃,连续4周。实验末测定血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平。采用HE染色观察大鼠胸主动脉血管的组织形态学特点,采用免疫组化技术分析大鼠胸主动脉TLR6蛋白的表达情况,采用荧光定量PCR技术检测胸主动脉TLR6 mRNA的定量表达水平。结果:1、血脂结果:模型组及药物组的tc水平、ldl-c水平与对照组相比均显著上升,其差异具有统计学意义(p<0.05),而药物组较之模型组,其tc水平、ldl-c水平明显降低(p<0.05)。三组之间的tg及hdl-c水平无显著性差异(p>0.05)。2.病理形态学结果:对照组可见胸主动脉血管各层结构排列正常,管壁比较完整,管壁内膜光滑,内皮细胞排列均匀而整齐。模型组可见胸主动脉血管组织各层结构排列不规则,管壁内膜不完整,可见其明显增厚,同时在管壁内有大量增生的平滑肌细胞,脂质斑块弥漫,可见大量的泡沫细胞聚集,并有大量脂质沉积、钙化及炎症细胞浸润。药物组可见胸主动脉血管组织各层结构排列欠规则,管壁内膜欠完整,可见其稍增厚,同时在管壁内有少量平滑肌细胞增生及炎性细胞浸润,可见少量的泡沫细胞聚集,血管壁脂质沉积和钙化较模型组减轻。3.免疫组织化学结果:tlr6蛋白在大鼠胸主动脉中均可见表达,模型组及药物组的tlr6蛋白表达水平与对照组相比均升高(p<0.05),而药物组较之模型组,其tlr6蛋白表达水平降低(p<0.05)。4.荧光定量pcr检测结果:模型组与对照组及药物组相比,其胸主动脉tlr6mrna表达水平较高(p<0.05),而药物组较之模型组,其tlr6mrna表达水平降低(p<0.05)。结论:1.大鼠动脉粥样硬化模型tlr6的表达水平升高。2.瑞舒伐他汀可能通过下调TLR6的表达从而改善动脉粥样硬化。
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