【摘 要】
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背景:茯苓（Poria Cocos）作为药食同源的中药材之一,富含多糖、三萜类、二萜类、甾醇类、挥发油等多种活性化合物。其中,多糖类是其发挥药理作用的主要活性化合物,具有抗氧化、抗肿瘤、免疫调节、保肝及降血糖等药理作用。由于许多天然多糖的生物活性不高,所以对多糖分子进行修饰改变其结构和构象进而增强其生物活性尤为重要。目的:采用超声-微波协同辅助萃取茯苓多糖并得到最佳提取条件,通过制备硫酸化茯苓多糖
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背景:茯苓（Poria Cocos）作为药食同源的中药材之一,富含多糖、三萜类、二萜类、甾醇类、挥发油等多种活性化合物。其中,多糖类是其发挥药理作用的主要活性化合物,具有抗氧化、抗肿瘤、免疫调节、保肝及降血糖等药理作用。由于许多天然多糖的生物活性不高,所以对多糖分子进行修饰改变其结构和构象进而增强其生物活性尤为重要。目的:采用超声-微波协同辅助萃取茯苓多糖并得到最佳提取条件,通过制备硫酸化茯苓多糖,探究茯苓多糖（Poria Cocos polysaccharides,PCP）及其硫酸化衍生物对胃癌MGC 803细胞增殖抑制作用的影响。方法:（1）采用单因素和正交优化试验探究获得超声-微波协同辅助萃取茯苓多糖的最佳提取条件;（2）采用Sevage法对茯苓多糖进行脱蛋白处理,再利用三氧化硫-吡啶法对多糖进行硫酸化修饰;（3）通过考察对DPPH·自由基、·OH自由基、ABTS·自由基、O2-·自由基的清除能力,研究茯苓多糖PCP及硫酸化衍生物的体外抗氧化能力;（4）采用CCK-8法、划痕实验、hoechest33342染色实验和Annexin V-FITC/PI双染法研究茯苓多糖及硫酸化衍生物抑制胃癌细胞MGC 803的增殖作用。结果:（1）超声-微波协同辅助提取茯苓多糖最佳提取条件为提取时间10min,液料比1:40,超声波功率150 W,微波功率200 W;（2）硫酸化修饰获得PCP-S1、PCP-S2、PCP-S3三种硫酸化茯苓多糖,取代度分别达0.29±0.03、0.41±0.07、0.66±0.05,并用红外光谱、扫描电子显微镜进行结构表征,表明成功获得硫酸化茯苓多糖衍生物;（3）体外抗氧化结果显示,PCP对ABTS·自由基的清除效果最好,其次是DPPH·自由基,而对·OH自由基和O2-·自由基的清除能力相对较差,且与PCP相比,三种硫酸化衍生物的体外抗氧化能力较优,且随着取代度的增大清除率随之增加;（4）茯苓多糖及其硫酸化衍生物对胃癌MGC 803细胞的增殖有显著的抑制作用,呈浓度依赖性,且随着取代度的增加而增加,并可减弱胃癌MGC 803细胞的迁移能力,促进细胞凋亡。结论:1.硫酸化修饰后的茯苓多糖增强了其体外抗氧化活性,且随着取代度的增大清除率随之增加。2.茯苓多糖及其硫酸化衍生物对胃癌MGC 803细胞有显著的抑制作用,能促进其凋亡,可减弱胃癌MGC 803细胞的迁移能力,且硫酸化修饰后的茯苓多糖增强了其抗癌活性,且随着取代度的增大抗癌活性增加。
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