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目的:近年来,放射治疗发展日新月异,包括放疗技术的革新和临床治疗模式的转变。然而放射治疗在不断提高肿瘤局部控制率,延长病人总生存时间的同时,也会带来各种并发症,其中以放射性皮肤损伤最为常见。急性放射性皮肤损伤也称为放射性皮炎,约95%以上的放疗病人会出现不同程度的皮肤反应,严重时可造成患者治疗中断,影响肿瘤局部控制率。趋化因子（chemokine,CCL）是分泌型小分子家族蛋白的细胞因子,具有趋化细胞迁移的功能,诱导淋巴细胞归巢（homing）于机体的特定部位,具有介导免疫应答和炎性反应等功能。趋化因子受体-10（CC chemokine receptors 10,CCR10）是CCR型趋化因子受体的一种,与CCL27（CC chemokine ligand 27,CCL27）相结合,在皮肤局部产生免疫应答。本研究以部分敲除CCR10的C57BL/6(CCR10+/-)小鼠为动物模型,通过繁殖,可获得3种不同基因型小鼠(CCR10+/+,CCR10+/-,CCR10-/-)。采用不同剂量的X射线照射后,观察不同基因型小鼠皮肤中CCL27分泌的变化。方法:以CCR10+/+,CCR10+/-,CCR10-/-三种基因型小鼠为研究对象,采用ELISA方法检测受照射的不同基因型小鼠皮肤内CCL27的分泌水平,与未照射组进行对照分析。照射模式分为5Gy X射线单次照射和30Gy X射线分割照射,分别在照射结束后当天（0天）,3天,7天和10天检测小鼠皮肤中的CCL27和IL-1β浓度,同时取部分受照射皮肤组织标本进行免疫荧光染色和HE染色,观察照射后CCL27在皮肤上的分布情况,以及皮肤的炎症反应。此外,采用三种基因型小鼠,两两进行配对缝合(CCR10+/-和CCR10+/-,CCR10+/-和CCR10-/-,CCR10-/-和CCR10+/-),分为三组,每组5对,进行免疫联体实验,两个月后,采用流式细胞术检测两只联体小鼠免疫细胞平衡情况。免疫细胞达到平衡后,经5Gy X射线单次照射联体鼠中的一只,另一只则用铅门屏蔽。采用ELISA方法检测每对联体鼠皮肤和血液中CCL27和IL-1β的浓度,并取部分皮肤组织进行HE染色,观察照射组与未照射组小鼠皮肤的炎症程度。结果:1、单次照射结果:未经照射的不同基因型小鼠皮肤中CCL27及IL-1β之间无明显差异（P>0.05）。经5Gy X射线单次照射后,小鼠皮肤中的CCL27浓度在照射后3、7、10天逐渐上升,并在10天浓度达到最高水平（P<0.01）。在照射后的第10天,CCR10+/-和CCR10-/-小鼠皮肤中CCL27浓度均明显高于CCR10+/+小鼠（P<0.01,P<0.01）。同时,采用免疫荧光染色结果显示经5Gy X射线照射后CCL27主要分布于皮肤表层、毛干和毛囊处,并且在照射后的第7和第10天,CCL27的荧光强度均明显增加。ELISA检测皮肤IL-1β的结果显示,其中CCR10+/-和CCR10-/-小鼠照射后当天和第3天,皮肤中IL-1β含量显著增加（P<0.01）,在照射10天后左右渐恢复至正常水平。HE染色显示照射后小鼠皮肤结构层次紊乱,皮下、毛囊和毛干等处有炎性细胞浸润。2、分割照射结果:经30Gy X射线分割照射后,ELISA结果显示受照射小鼠CCL27浓度分别在0天、3天和7天三个时间点较对照组均有明显降低（P<0.01,P<0.01,P<0.01）,至10天时渐恢复至对照组水平,同时CCR10+/-和CCR10-/-小鼠皮肤中CCL27浓度明显高于CCR10+/+小鼠（P<0.01,P<0.05）。免疫荧光结果显示在照射后0天和3天,CCL27在皮肤表层荧光强度较弱,提示其表达量下降。在7天和10天,CCL27开始在皮肤真皮层和毛囊处聚集,并有少量分布在表皮层。ELISA检测IL-1β浓度,结果显示三种基因型小鼠在第7天和第10天,其皮肤中IL-1β的浓度较对照组均不同程度的增加,此外,CCR10+/-与CCR10-/-小鼠的IL-1β浓度经照射后的第7天和第10天较CCR10+/+小鼠显著升高（P<0.01,P<0.01）。HE结果显示CCR10+/-与CCR10-/-小鼠经照射后皮肤下结构紊乱,毛干、毛囊等皮肤附件可见大量炎性细胞浸润。3、免疫联体实验,选取两种不同基因型的小鼠(CCR10+/-CD45.2和CCR10-/-CD45.1/2)麻醉后采用水平褥式外翻缝合方法将其背部皮肤缝合在一起,两个月后,分离小鼠脾脏淋巴细胞,进行流式检测,结果显示CCR10+/-和CCR10-/-小鼠脾脏中表达CD45.2的免疫细胞百分比分别为99.8%和99.2%,提示两种小鼠通过联体建立的血液循环达到免疫细胞平衡状态。经5GyX射线照射后,三对联体鼠CCR10+/-和CCR10+/-（以下简写为H-H）,CCR10+/-和CCR10-/-（以下简写为H-KO）,CCR10-/-和CCR10+/-（以下简写为KO-H）中,未受到照射小鼠皮肤中,CCL27及IL-1β较对照组明显升高,但血液中的CCL27和IL-1β浓度与对照组比较无明显差异（P>0.05）。HE结果显示受照射H-H组和H-KO组中,未受照射的小鼠皮肤中也呈现轻度炎性反应。结论:1.CCR10敲除小鼠受到单次照射后,CCL27的分泌明显增加,且皮肤炎性反应加重。2.分割照射造成小鼠皮肤角质形成细胞受损,进而使其分泌CCL27减少,但IL-1β的分泌持续增加,加重了炎症反应。3.成功建立免疫联体实验模型,2个月后两只小鼠的免疫细胞达到平衡。照射组中的未受照小鼠皮肤中的CCL27浓度与对照组之间具有明显差异,提示辐射可通过旁效应诱导未受照射的皮肤分泌CCL27,并伴有炎性改变。