目的:近年来,喉癌发病率有增无减,是我国耳鼻咽喉头颈外科常见的恶性肿瘤,其病死率约占恶性肿瘤的0.75%,约95%以上是鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma,SCC),是喉部恶性肿瘤最常见的病理类型。与其他恶性肿瘤一样,喉癌的发生发展涉及多重因素,且其过程十分复杂,其中细胞周期调控紊乱与肿瘤的发生关系十分密切。细胞周期蛋白(cyclin)、细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependentkinase,CDK)以及细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂(cyclin-dependentkinase inhibitor,CKI)是细胞周期调控中的三大分子,其中CKIs具有负性调控细胞周期的作用。p27作为细胞周期蛋白依赖激酶抑制剂家族成员之一,主要通过抑制cyclin/CDK复合体活性,致细胞周期无法通过G1/S限制点而滞于G1期,终止细胞周期的进程。Bmi-1可通过调控PTEN-AKT-GSK3β信号通路而上调核内的cyclin D1的表达和下调p27在核内的表达,促进细胞周期跨过G1/S限制点,加速细胞分裂的进程。婆罗双树样基因4(SALL4)能够激活经典的Wnt信号转导通路,进而诱导此通路下游靶基因c-myc的转录和翻译,c-myc的C末端可与Max结合形成复合物c-myc/Max并结合于p27的启动子序列,抑制p27基因的转录,从而影响p27的表达而致使细胞周期调控紊乱。本次研究通过免疫组织化学的方法,主要检测SALL4、Bmi-1及p27蛋白在喉鳞状细胞癌组织的表达情况,探讨三者在喉癌发生发展中的作用,并分析三者相关性,以探索喉癌的发生、浸润及转移的机制,从而为喉癌在分子靶向治疗方面提供线索和可靠依据方法:1选择河北医科大学第四医院耳鼻咽喉-头颈外科2015年3月至2016年10月行手术治疗并经术后病理证实的喉鳞状细胞癌患者的标本组织51例作为试验组,喉癌旁组织21例作为对照组,采用免疫组织化学染色法(S-P法),检测两组中SALL4、Bmi-1及p27的表达情况,进一步分析三者在喉鳞状细胞癌中表达的相关性。2上述实验数据均应用统计软件spss21.0进行统计分析,以p<0.05为差异有统计学意义。结果:1sall4的表达结果sall4的阳性表达主要集中在细胞核,表现为细胞核内出现棕黄色或棕褐色颗粒,也有少量细胞质内呈现淡黄色或棕褐色。sall4在喉鳞状细胞癌组及癌旁组织组阳性表达率分别为64.7%、47.6%,前者表达率明显高于后者,差异有统计学意义(p<0.05)。在喉鳞状细胞癌组织中sall4的阳性表达与临床分期密切相关,Ⅰ+Ⅱ期喉癌病例组的阳性表达率为53.3%,在Ⅲ+Ⅳ期喉癌病例组的阳性表达率为81.0%,后者阳性表达率明显高于前者,喉癌临床分期越晚,sall4的阳性表达越高(p<0.05)。sall4在喉癌组织中的表达与肿瘤分化程度亦密切相关,在高、中、低分化的癌组织中其阳性表达率分别为33.3%、70.8%、80.0%,随着喉癌组织恶性程度越高,sall4的阳性表达水平也逐渐升高(p<0.05)。sall4在伴有淋巴结转移组的阳性表达率(84.2%)高于在无淋巴结转移组的阳性表达率(53.1%),两组表达率有统计学差异(p<0.05)。sall4在不同年龄、性别、吸烟量、肿瘤大小及临床分型的喉癌组织中的表达无统计学差异(p>0.05)。2bmi-1的表达结果bmi-1的阳性表达主要集中在细胞核,表现为细胞核内呈现棕黄色或者棕色颗粒,也有少部分细胞质内呈现棕黄色颗粒。bmi-1在喉鳞状细胞癌组阳性表达率(66.7%)明显高于癌旁组织组阳性表达率(9.5%),二者的差异有统计学意义(p<0.05)。bmi-1在Ⅲ+Ⅳ期病例组的阳性表达率(87.5%)明显高于在Ⅰ+Ⅱ期病例组的阳性表达率(58.6%),bmi-1在喉癌组织中的表达与喉癌临床分期关系密切,bmi-1表达随着临床分期越晚其阳性表达率越高(p<0.05)。bmi-1在高、中、低分化的喉癌组织中阳性表达率分别为33.3%、75.0%、80.0%,bmi-1的表达随着喉癌组织分化程度逐渐降低而逐渐增强(p<0.05)。bmi-1的表达与有无淋巴结转移密切相关,在伴有淋巴结转移组的阳性表达率高于无淋巴结转移组的阳性表达率(84.2%vs56.3%,p<0.05)。bmi-1在不同年龄、性别、吸烟量、肿瘤大小及临床分型的喉癌组织中的表达无统计学差异(p>0.05)。3p27的表达结果p27的阳性表达主要集中在细胞核,表现为细胞核内呈现棕黄色或者棕色颗粒。p27在喉鳞状细胞癌组及癌旁组织组的阳性表达率分别为47.1%和71.4%,两组的差异有统计学意义(p<0.05)。p27在喉癌组织中的表达与肿瘤分化程度密切相关,其在高、中、低分化喉癌组中的阳性表达率分别为66.7%、45.8%、13.3%,差异有显著统计学意义(p<0.05)。p27在伴有淋巴结转移组的阳性表达率和无淋巴结转移组的阳性表达率分别为31.6%和65.6%,二者的差异有统计学意义(p<0.05)。p27在Ⅰ+Ⅱ期病例组的阳性表达率为40.0%,在Ⅲ+Ⅳ期病例组的阳性表达率为57.1%,前者阳性表达率明显低于后者,但两组表达无统计学差异(p>0.05)。p27在不同年龄、性别、吸烟量、肿瘤大小及临床分型的喉癌组织中的表达无统计学差异(p>0.05)。4sall4、bmi-1及p27的相关性分析实验数据显示,在喉鳞癌中sall4、bmi-1及p27的表达两两呈相关关系。bmi-1与sall4在喉鳞状细胞癌中的表达呈正相关关系(r=0.383,p=0.006),bmi-1与p27在喉鳞状细胞癌中的表达呈负相关关系(r=-0.374,p=0.007),p27与sall4在喉鳞状细胞癌中的表达呈负相关关系(r=-0.314,p=0.025)。结论:1sall4蛋白在喉鳞状细胞癌组织及癌旁组织中均有表达,但在前者的表达水平明显高于后者,提示sall4可能与喉癌的发生密切相关。2sall4及bmi-1蛋白在喉鳞状细胞癌组织中的阳性表达率均与肿瘤分化程度、临床分期及局部淋巴结转移相关,表明两者可能与喉鳞状细胞癌的发生、发展、浸润及转移密切相关。3在喉鳞状细胞癌中,bmi-1蛋白与sall4蛋白的表达呈正相关,p27蛋白与sall4蛋白的表达呈负相关,bmi-1蛋白与p27蛋白的表达呈负相关。4联合检测sall4、bmi-1及p27蛋白在喉鳞状细胞癌组织的表达情况,有助于探索了解三者在喉癌发生发展中的作用及相关性,从而为喉癌在分子靶向治疗方面提供理论依据。