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本实验利用本研究室发酵纯化得到了野生型与突变型天蓝色链霉菌漆酶。在研究了野生型与突变型链霉菌酶学性质的基础上,研究了突变型漆酶对催化乳清分离蛋白与高甲氧基柑橘果胶交联成膜的影响;研究了突变型漆酶催化羧甲基壳聚糖与没食子酸接枝的影响;将羧甲基壳聚糖与没食子酸接枝产物应用于草莓保鲜中,研究了接枝产物的应用可行性。为羧甲基壳聚糖与没食子酸接枝产物在食品领域中的应用提供依据,主要研究结果分述如下:1.野生型与突变型链霉菌漆酶酶学性质的对比。发酵纯化制备了野生型与突变型链霉菌漆酶,探索了野生型与突变型链霉菌漆酶酶学性质的差异。其中,野生型链霉菌漆酶在发酵纯化过程中的回收率较高;在研究金属离子对野生型与突变型链霉菌漆酶酶活性的影响中发现,Fe2+对突变型链霉菌漆酶的酶活性具有显著的激活效果,同时,Fe3+则对野生型链霉菌漆酶酶活性具有明显的激活作用;在研究蛋白抑制剂对野生型与突变型链霉菌漆酶酶活性的影响中发现,浓度为100 mM的L-半胱氨酸对野生型与突变型链霉菌的酶活具有明显的抑制作用;底物特异性研究发现,经过突变,漆酶对于酚酸类物质,例如没食子酸,愈创木酚等物质的亲和性增强了:最适反应温度与pH结果显示,经突变后,这两种性质并无明显变化:温度与pH稳定性则表示,经突变后,漆酶的稳定性有所降低;对两种漆酶进行圆二色谱分析,结果显示经突变后,漆酶的柔性结构含量增多,稳定性随之下降。2.突变型漆酶催化乳清分离蛋白与高甲氧基柑橘果胶交联成膜的研究。以2:1的比例制备乳清分离蛋白与果胶混合溶液,并将其置于不同浓度下的链霉菌漆酶中进行交联反应,成膜后检测了其抗拉强度,断裂伸长率,含水率,阻隔性能等物理性能指标,与此同时检测了薄膜的傅里叶红外光谱、差示量热扫描,扫描电镜等性质,探究引起宏观性质变化的微观机理。结果显示,随着链霉菌漆酶浓度的增加,薄膜的各种性质基本呈现先变好再变坏的变化趋势。当漆酶浓度为6U/100mL时,薄膜的抗拉强敌与断裂伸长率达到最优,分别为3.23 MPa和40.88%,表现出较优的强度与延展性;薄膜的透明度则在漆酶浓度为4 U/100 mL时最好,有利于提高消费者的接受程度;而添加不同浓度的漆酶,对薄膜的颜色并无显著性影响;同时,研究漆酶的含水率及阻隔性能,发现漆酶浓度为6U/100mL时,薄膜具有较低的含水率及优良的阻气、阻水性能,这有利于薄膜自身的贮藏与保鲜应用;对薄膜进行热稳定性,结晶度以及红外光谱研究,结果显示当薄膜中漆酶浓度为6U/100mL时,薄膜具有良好的二级结构;同时,扫描电镜结果也进一步从微观结构上说明漆酶浓度在6 U/100mL时能获得较良好的乳清分离蛋白-果胶复合膜。3.突变型漆酶催化羧甲基壳聚糖与没食子酸接枝及其在草莓保鲜中的应用。以羧甲基壳聚糖与没食子酸为反应底物,添加漆酶使其成功接枝,得到接枝产物,接枝产物的自由基清除能力有了明显增高,然后将不同浓度的接枝产物应用于草莓保鲜当中,分析了经不同处理的草莓在贮藏期间颜色、硬度、可溶性固形物含量、抗坏血酸含量、呼吸强度、还原性谷胱甘肽含量、过氧化氢酶(CAT)活性、抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性以及超氧化物歧化酶(SOD)活性等性质。结果显示:经浓度为1.5%的接枝产物(GA-g-CMCS)处理的草莓在贮藏期间的腐烂率最小,而经浓度为1.0%的GA-g-CMCS处理的草莓在贮藏期间的失重率与呼吸强度最小,硬度最大;贮藏期间各组草莓的颜色并无显著性差异;生化指标显示,经浓度为1.5%的GA-g-CMCS处理的草莓在贮藏期间的可溶性固形物含量、抗坏血酸含量、还原型谷胱甘肽含量以及过氧化氢酶、抗坏血酸过氧化物酶和超氧化物歧化酶活性都较其他组高。因此,浓度为1.5%的GA-g-CMCS对草莓具有良好的保鲜效果。