论文部分内容阅读
本文就Fe3O4磁性纳米粒的制备及其表面功能化、微米级磁珠的制备以及其在DNA分离纯化中的应用进行相关研究。利用经典的化学共沉淀法制备出表面富含羟基的水溶性良好的Fe3O4磁性纳米粒,该纳米粒近球形,粒径在15nm左右,但存在一定程度的团聚现象。而后分别采用原位法和后处理法用聚乙烯亚胺(PEI)和硅烷偶联剂3-(2,3-环氧丙氧)丙基三甲氧基硅烷(KH560)对Fe3O4粒子进行表面修饰,得到氨基化和硅烷化的磁性纳米粒,可改善粒子的分散性,同时带上活性氨基、环氧基活性基团。利用大分子聚乙烯亚胺(PEI)和聚丙烯酸(PAA)对表面功能化的磁性纳米粒进行交联,制备出三种(Fe3O4-KH560-PEI、Fe3O4-PEI-BDE-PEI、Fe3O4-PEI-PAA)不同的微米级磁珠,并分别对其粒径、电位、形貌、磁响应性、悬浮稳定性等性质进行表征和比较,综合得出Fe3O4-KH560-PEI磁珠性能最优,显著改善粒子的磁响应性,磁分离1min其剩磁率可降至12.24%,2min降至5.86%;同时由于表面富含氨基,电荷明显,在水中分散稳定,30min后溶液中仍悬浮有97.18%的粒子;与医用磁珠相比,该磁珠形貌不规则,大小不均匀,粒径较小,单个磁珠含有较少的磁性纳米粒,磁响应性略差;但粒径小能有效减少反应的空间位阻,提高反应的灵敏度;表面含有大量氨基,利于与其他活性物质连接,可扩大其应用。以性能良好的Fe3O4-KH560-PEI磁珠为载体,以鲱鱼精子DNA为模板DNA,考察Fe3O4-KH560-PEI磁珠对DNA的分离性能,利用静电相互作用磁珠在低pH下吸附DNA,在高pH下解吸附DNA,实现DNA的分离纯化。通过对吸附、解吸附作用影响因素(如pH、时间、温度、离子强度等)的考察,得出吸附、解吸附的最佳条件分别为pH=3、37℃、不加盐、反应10min和pH=11、37℃、不加盐、反应10min。实验结果表明使用该磁珠可通过磁场对DNA进行快速分离,简单快捷;对DNA的固载量可达629.49 mg/g;同时磁珠还可循环利用,经六次使用其吸附率仍保持在50%以上,有望在实际应用中凸显其优势。