HBx蛋白在乙肝相关型肝细胞癌及癌旁组织中的表达意义及其对预后的影响

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背景:原发性肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)是指来源于肝细胞的原发性恶性肿瘤,是世界范围内发病率、死亡率最高的消化道恶性肿瘤之一,其发病隐匿、进展迅速、治疗困难、预后极差已成为公认的世界难题。目前研究表明:在我国乃至东南亚各国导致原发性肝癌最主要的原因是慢性乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)感染,而HBV所致的HCC的具体机理则是纷繁复杂的,包括HBV-DNA随机插入人类染色体、HBx广泛的反式激活功能和干扰调控基因转录、HBV核心启动子自然突变及慢性肝细胞受损继发肝细胞转化再生的形成等,最终诱导肿瘤的发生。近年来,由于对HBx蛋白研究的不断深入,发现其广泛的反式基因激活作用、参与调节多种细胞信号转导通路、DNA损伤修复及表观遗传学修饰等功能与乙肝相关型肝癌的发生发展密切相关,而引起广泛关注。此外,HBx蛋白可结合于P53蛋白C末端阻碍其促凋亡、中断异常细胞生长和DNA修复功能;HBx竞争性结合于APC(adenomatous polyposis coli,APC)蛋白使β连环蛋白从降解复合物中分离,导致β-连环蛋白在细胞核聚集,激活Wnt信号通路诱导肿瘤生成;甚至促进了毛玻璃样肝细胞向癌细胞的转化。目的:本研究通过免疫组化方法检测HBx蛋白在乙肝相关型肝细胞癌癌组织及癌旁组织(距肿瘤边缘<2cm)中的表达水平,通过比较分析,探讨在上述组织中HBx蛋白的表达特点以及与数个临床因素之间的关系,进一步阐述其致癌机制并为HCC的预防和诊治提供有效的理论依据。方法:通过使用免疫组织化(Elivision二步法)的研究方法,检测我院单一治疗组40例临床资料完整、根治性手术切除的肝细胞癌癌组织以及对应的癌旁组织中的HBx蛋白的表达特点,分析其与数个临床因素的关系,包括:性别、年龄、TNM分期、HBV-DNA负荷、AFP、是否合并肝硬化、是否合并脉管侵犯、肿瘤淋巴细胞浸润(TIL)、Edmondson-Steiner病理分级及术后无瘤生存时间(本研究中为24个月内有无复发)。结果:1、在40例HBV相关HCC中,HBx蛋白在癌旁组织中阳性率为75%(30/40)高于癌组织中(40%,16/40)的表达,差异有统计意义(P<0.05);2、在肝癌癌旁组织中HBV-DNA<500 IU/ml的病例,HBx阳性表达率33.33%(2/6);在HBV-DNA≥500 IU/ml病例中,HBx阳性表达率82.35%(28/34),差异有统计意义(P<0.05)。癌旁组织中HBx的表达与年龄、性别、肝硬化及血清AFP水平相关性不显著;3、在癌组织合并脉管侵犯的病例中,HBx阳性表达率66.67%(8/12);在无脉管侵犯的病例中,HBx阳性表达率28.57%(8/28),差异有统计意义(P<0.05)。癌组织中HBx的表达与TNM分期、Edmondson-Steiner病理分级关系不显著;4、在癌旁组织淋巴细胞浸润的病例中,HBx阳性表达率86.67%(26/30);在少淋巴细胞浸润的病例中,HBx阳性表达率40%(4/10),差异有统计意义(P<0.05)。在癌组织无瘤生存期(DFS)<24月的病例中,HBx阳性表达率69.23%(9/13);在无瘤生存期(DFS)≥24月的病例中,HBx阳性表达率25.93%(7/27),差异有统计意义(P<0.05);结论:HBx蛋白在HBV相关HCC癌旁组织中高表达,癌组织中低表达,并且在癌旁组织中与患者血清HBV-DNA负荷、淋巴细胞浸润正相关;癌组织中与脉管侵犯正相关、DFS负相关。癌组织中高HBx的表达可能预示较差的预后、癌旁组织中HBx的高表达可能预示着较好的预后。
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