本试验以野生型烟草“革新1号”的叶盘为受体，通过根癌农杆菌介导法将具有广谱抗真菌作用的几丁质酶基因与β-1，3-葡聚糖酶基因构成的双价防卫基因(CHG)和病程相关基因非表达子1(NPR1基因)分别转化烟草和共同转化烟草，再对所获得的转基因植株进行分子检测和抗病性检测，并比较了不同转基因植株的抗病效果，其主要结果如下： 1.单转CHG基因植株分子生物学鉴定对经抗性筛选得到的转基因植株进行PCR检测，结果表明：21棵转基因植株显示出与阳性对照质粒pZ100相同的特异条带，非转化植株未出现与阳性对照相同的特异条带。 2.单转NPR1基因植株分子生物学鉴定对经抗性筛选得到的转基因植株进行GUS组织化学检测，初步筛选确定得到26棵GUS阳性转基因植株。对GUS阳性的植株做PCR检测，结果表明：每个GUS阳性植株均显示与阳性对照质粒pCAMBIA1301-35SN相同的特异条带，非转化植株未出现与阳性对照相同的特异条带。 3.CHG基因和NPR1基因共转化植株分子生物学鉴定对经抗性筛选得到的转基因植株进行GUS组织化学检测，初步筛选确定得到19棵GUS阳性转基因植株。对GUS阳性的植株做PCR检测，结果表明：每个GUS阳性植株均显示与阳性对照质粒pCAMBIA1301-35SN相同的特异条带，19棵GUS阳性植株中15棵植株出现与阳性对照质粒pZ100相同的特异条带，非转化植株未出现与阳性对照相同的特异条带。 4.转基因植株抗病性检测将转基因烟草植株进行炭疽菌接种试验，结果表明：接种病菌后第7天三种转基因后代植株病情指数分别为：单转CHG基因的转基因植株病情指数为33.45±0.95﹪、单转NPR1基因的转基因植株病情指数为37.72±1.48﹪、CHG基因和NPR1基因共转化转基因植株病情指数为20.26±0.66﹪，而对照植株的病情指数为79.09±0.99﹪。统计分析表明，转基因烟草与非转基因烟草对炭疽病的抗性有极显著差异，其中共转化获得的转基因烟草植株抗性与其余三组的抗性差异最显著； 对转基因烟草植株接种烟草花叶病毒并统计病情指数，结果显示：接种后第9天统计单转CHG基因的转基因植株病情指数为55.67±1.36﹪、单转NPR1基因的转基因植株病情指数为54.17±1.03﹪、CHG基因和NPR1基因共转化转基因植株病情指数为52.17±1.19﹪，而非转基因植株的病情指数为61.00±1.00﹪。由数据分析可见转基因烟草植株比非转基因烟草植株对烟草花叶病毒的病情指数略有降低，但统计分析表明二者之间无显著差异。 本研究的主要创新之处：首次将NPR1基因转入烟草，获得了比对照对炭疽病抗性增强的转基因后代；同时又将CHG基因和NPR1基因共同转化烟草，获得了比单转CHG基因和单转NPR1基因对炭疽病抗性更强的转基因烟草。本试验所选用的受体材料“革新1号”烟草是大田栽培品种。因此，本试验的成功研究不仅为今后利用常规育种技术培育能够抵抗多种真菌病害烟草提供了优质的种质资源，同时也获得了一个在烟草生产中有可能直接被利用的新“革新1号”，由此将提高烟草生产的经济效益和环境效益。