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目的 多发性肌炎和皮肌炎(polymyositis/dermatomyositis,PM/DM)均属于特发性炎症性肌病,该病主要以近端肌无力及骨骼肌非化脓性炎症为特征,如肌炎同时伴有多种形态的皮疹者,称为皮肌炎。PM/DM的病因及发病机制尚未完全明确,目前研究显示PM是以细胞免疫为主、DM则是以体液免疫为主的自身免疫性疾病。糖皮质激素(glucocorticoid,GC)是下丘脑-垂体-肾上腺轴的关键分子,除具有重要的生理作用外,还具有很强的免疫抑制作用,临床上被广泛用于自身免疫性疾病的治疗。GC是目前治疗PM/DM的首选药物之一,但不同患者对GC的疗效不同,约1/5~1/3的PM/DM患者对GC治疗不敏感,甚至对GC治疗抵抗。GC抵抗病例的出现对临床治疗提出了严峻挑战,但对其确切机制尚不十分清楚。目前国内外尚未见有关PM/DM患者对GC治疗不敏感,甚至抵抗机制的系统研究。 GC的重要生理功能和药理作用是由细胞浆中的糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor GR)介导的。GC-GR紊乱与多种自身免疫性疾病相关。许多研究显示GR数量的多少同GC的临床疗效密切相关,GR数量多者对GC治疗敏感,而GR数量少者则对GC治疗不敏感,甚至抵抗。在无GC作用时,GR是与两分子热休克蛋白90(heat shock protein 90,HSP90)结合形成复合体存在于细胞浆中,GR的DNA结合区被HSP90遮盖,故不能与DNA结合。HSP90与GR的结合使GR处于比较稳定的非活化状态,并能保证受体(GR)与配体(GC)呈高亲和力和特异性结合。当GR和GC结合后GR发生构相改变而与HSP90解离,并且发生二聚化,该过程称为GR的活化。活化的* 二聚体与* 的复合物转位进人细胞核内而介导*的抗炎和免疫抑制等作用。因而HSpoo在GR的形成和功能发挥等方面起重要作用,其变化可影响GR的活性。HSpoo表达升高可在基因水平负性调节GR的活性,当HSpoo/GR之比处于合适状态时为正性调节,而HSpoo/GR之比过高或过低均为负性调节,并且 HSpoo在组织中的分布决定GC作用的敏感性和特异性。在炎症和自身免疫等病理情况下HSppo表达升高。 GR基因在转录过程中的拼接改变产生高度同源的两个不同表位a和p。GRa即经典的GR,可与GC结合后活化,从而介导切的重要生理和药理作用;GRP则为GR的变异体形式,不能与GC结合,也不具有转录激活作用。细胞转染研究显示GRp是GR。的内源性抑制因子,并且在一些GC抵抗型患者外周血单个核细胞(PBMCs )中GRp mRNA表达水平升高,提示GRp表达水平升高可能导致GC抵抗。进一步研究发现GRS可以以剂量依赖性的方式抑制 GRa的转录活性,但只有 GRP超过 GRa 5-10倍摩尔浓度时才可观察到对GRa的抑制作用;然而有研究发现即使GR6超过GRd 倍摩尔浓度,对GRa也无抑制作用。因而GRp是否能够通过抑制GR。的功能而影响GC疗效尚有待于进一步研究。 但上述研究有的只是用放射免疫配体方法从整体上检测GR数量的变化,而未区分GR的两个不同表位a和p,也未对GR的重要分子伴侣HSP90进行研究。有的虽对GRa和GRP进行了研究,但结果不一致,甚至相反。目前国内外尚未见有关PM/DM患者PBMCS中GR、HSpoo、GR。及GRp mRNA表达的研究报道。 近年来研究表明:神经内分泌系统对免疫系统具有重要的调节作用。神经系统通过其广泛的外周神经突触及神经细胞分泌的神经递质和众多的内分泌激素,甚至还有细胞因子共同调控免疫系统的功能;而免疫系统则通过免疫细胞产生的多种细胞因子和激素祥物质反馈作用于神经内分泌系统。这种双向的复杂作用使两个系统内或系统间得以相互交通和调节,共同维持机体的稳态。当这种稳态被各种外来或内在的因素打破时,某些病理过程和疾病就可能出现。多种自身免疫性疾病存在神经内分泌的异常。神经肽Y(neuroPePtide Y,NPY)在一内啡肽(beta-endorphin,p-EP)和降钙基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGny)作为重要的神经肽, ·2·与一些自身免疫性疾病的关系已有报道,但NPY和p-EP与PM/DM的关系国内外尚未见报道。 我们采用逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)方法对28例PM/DM患者PBMCs中GR、HSpoo、GRa和GRp InRNA的表达水平进行检测,以探讨其表达水平同PM/DM患者对GC疗效的相关性。同时采用放射免疫分析法检测上述患者血清皮质醇和血浆中NPY在一EP及CGRP的含量,以探讨其在PMIDM患者中的变化及意义。 材料与方法 一、研究对象 二.病例选择:28例PM/DM患者选自我院皮肤科门诊和住院患者,均符合 1975年 Bohan和 Peter的 PM/DM诊断标准。其中 PM 11例,DM 17例;男12例,女16例;年龄21-68岁;初发者20例,复发者8例;发病时间5天一2年。根据临床、实验室检查及辅助检查均处于疾病活动期,并除外严重肝脏疾病和肿瘤。近二月内未使用过GC治疗。20例正常对照选自健康献血员,性别和年龄与患者相比无显著性差异。 2.GC疗效的判定:PM/DM患者按泼尼松 1叫.sing·kg-‘·