论文部分内容阅读
目的：通过用流式细胞技术检测重组腺相关病毒感染lovo直肠癌患者的DC诱导CTL对lovo直肠癌细胞的杀伤率和DC的CEA和CD分子的表达，证明此种感染诱导方法可以增强诱导的CTL的能力，并且可以提高患者DC细胞的成熟。方法：利用密度梯度离心法从患者体内获取单个核细胞再联合应用rhGM-CSF、rhIL-4和rhTNF-α细胞因子诱导DC成熟，分成实验组和对照组，实验组加入携带CEA重组腺相关病毒感染DC诱导CTL，对照组加入等量的PBS。用流式细胞术检测DC的表型及CTL对lovo肿瘤细胞的杀伤活性。采用SPSS16.0统计软件对实验数据进行统计分析。结果:1形态学观察：DC从培养第2天起细胞形态出现不规则改变，周边可见少量突起，第4天加入rhTNF‐α后，细胞体积增大，细胞表面有大量长短不一的突触,与正常DC相比,未见明显差别,提示rAAV病毒感染并不影响DC的生长。2实验组DC的CD40、CD80、CD86表达率分别为(81.95±1.45)%、(80.10±1.03)%和(58.93±1.84)%，而对照组DC的CD40、CD80、CD86表达率分别为(72.27±1.59)%、(70.59±1.04)%和(48.66±1.97)%，两组差异有统计学意义，P<0.05。3实验组CEA的表达率为(59.04±1.68)%，对照组的CEA表达率为(46.03±1.23)%，两组差异有统计学意义，P<0.05。4在效靶比为12.5:1、25:1、50:1、100:1时实验组的杀伤率分别为(12.65±0.30)%、(25.77±2.53)%、(43.36±0.83)%和(61.03±1.83)%；而对照组的杀伤率分别为(6.59±0.21)%、(8.35±1.12)%、(12.79±0.23)%和(23.35±0.69)%，两组差异有统计学意义，P<0.05。并且随着效应细胞比例的增加，杀伤率也逐渐增加。结论1重组腺相关病毒携带CEA感染DC不影响DC的生长。2rAAV/CEA感染DC可以提高CD40、CD80、CD86的表达。3rAAV/CEA感染DC激活CTL在体外对lovo肿瘤细胞具有高效的杀伤作用。