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目的:运用基因芯片技术检测膝关节骨关节炎患者(Knee Osteoarthritis,KOA)关节液中microRNA的表达谱系,筛选出与正常人呈差异性表达的miRNAs,对部分表达差异显著的miRNAs进行荧光实时定量PCR(RealTime quantitative PCR,RT qPCR)验证。本研究拟通过分析KOA患者关节液中miRNAs的表达情况,找出对骨性关节炎早期诊断和治疗有意义的miRNAs。 方法: 1.收集4例不同严重程度的OA患者和2例健康正常人的关节液,使用Trizol法提取RNA后,运用Affymetrix miRNA2.0基因芯片检测2组OA患者和正常人关节液中miRNAs的表达谱系,聚类分析软件(cluster3.0)分析差异性表达的miRNAs。 2.运用RT-qPCR方法对表达具有显著差异性的miRNAs进行验证,挑选出丰度高且变化显著的miRNAs。 结果: 1.OA患者关节液中有13个miRNA呈显著差异性表达,其中miR-145,miR-22,miR-9,miR-155,miR-34c等5个明显上调。miR-582-3p,miR-146a(晚期),miR-1227,miR-634,miR-576-5p,miR-641,miR-140,miRNA-125b等8个明显下调。 2.与正常人比较,OA患者关节液中miR-22、miR-9表达上调,差异均有显著性意义(p<0.05), miR-140,miR-146a表达下调,差异具有统计学意义(p<0.05),验证结果与miRNA基因芯片结果一致。 结论:OA患者中不同程度差异表达的miRANs可能与OA的发生和发展相关,其中明显上调的miR-22,miR-9和下调的miR-146a, miR-140可能起到核心的作用。关于miR-146a在早期和晚期OA患者关节液中截然相反的表达结果,原因目前尚不清楚,我们猜测miR146a在OA发生和发展的过程中可能通过不同的靶基因起作用。