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关节软骨具有特殊的致密结构，缺乏血管、神经、淋巴组织的营养支持，受到创伤、退变、感染及其它因素导致的损伤常常难以自身修复。目前临床所使用的各种关节软骨治疗方法均存在某些不足之处，如供体来源有限、易继发免疫排斥反应等，且大多为纤维软骨修复，新生软骨没有优良的生物力学功能，远期修复效果差强人意。组织工程与再生医学的不断发展，为软骨的修复再生与重建提供了新的方法和思路。骨髓间充质干细胞（bone marrow-derived mesenchymal stem cells, BMSCs)是一种不稳定细胞，能进行无限分裂，增殖能力很强，在不同的诱导条件下可分化成为不同的细胞，取材简便、培养技术成熟、免疫排斥反应小，被认为是软骨组织工程中较为理想的种子细胞之一。关节软骨缺损修复过程，主要是在特殊的微环境下，通过各种生长因子诱导BMSCs分化成软骨细胞。单一生长因子诱导BMSCs向软骨细胞分化效果欠佳且价格昂贵，而联合应用多种生长因子修复软骨的方法逐渐受到重视。富血小板纤维蛋白（platelet-rich fibrin，PRF)是由自体血液离心制备而成，以血小板凝胶形式呈现，富含高浓度的血小板、多种生长因子和大量的纤维蛋白，其中纤维蛋白与血小板释放的生长因子以化学键的方式结合起来，能缓慢释放生长因子从而延长作用时间。第一部分自体富血小板纤维蛋白对兔骨髓间充质干细胞成软骨分化的影响目的：观察自体富血小板纤维蛋白（PRF)对体外培养的兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)成软骨分化的影响。方法：兔心脏采血制备PRF，电镜观察其超微结构。分离培养兔BMSCs，取第3代细胞用于实验，分为PRF组和阳性对照组，诱导培养21d后，对两组细胞分别进行形态学观察，成软骨鉴定染色（番煎0、甲苯胺蓝、HE、II型胶原免疫组化染色)，软骨相关基因表达检测（S0X9、II型胶原、Aggrecan、）。结果：PRF组和阳性对照组中BMSCs经诱导后，细胞由长梭形变为三角形、多角形、圆形；番煎0、甲苯胺蓝、HE、II型胶原免疫组化染色均为阳性；S0X9、II型胶原、Aggrecan基因表达水平均较高，两组比较无统计学差异(P>0.05)。结论：PRF在体外可促进兔BMSCs成软骨分化，可作为自体生物材料，在构建软骨组织工程中发挥更好的作用。第二部分自体富血小板纤维蛋白修复兔膝关节软骨全层缺损的实验研究目的：探讨自体富血小板纤维蛋白（PRF)体内修复兔膝关节软骨全层缺损的能力。方法:心脏采血制备PRF，将PRF膜片植入兔膝关节软骨全层缺损，分别于术后12W、24W后处死动物并收集标本，进行大体观察、生物力学性能分析、软骨组织学和组织免疫化学染色、生物化学成分分析，验证PRF膜片对关节软骨全层缺损的修复效果。结果：大体观察PRF组新生软骨表面光滑，修复良好。PRF组新生软骨的大体形态评分结果、生物力学指标、II型胶原及其mRNA的表达均显著优于空白组(P<0.05)，术后24W与正常软骨相比，未见显著差异（/^>0.05)。组织学染色可见新生软骨在各时间点，行番红0、甲苯胺蓝、II型胶原免疫组化染色均出现阳性表达，其结构形态与周围正常软骨十分相近。结论：PRF膜片能够有效修复兔关节软骨全层缺损，具有良好的临床应用前景。小结：本实验采用Choukroun方法利用自体血液快速离心制备PRF，体外诱导培养BMSCs21d后，结果充分证实了PRF作为一种自体来源的生物支架材料，其缓慢释放高浓度、符合人体生理比例的各种生长因子，可以体外诱导BMSCs分化为软骨细胞；将PRF膜片植入兔关节软骨全层缺损处，行组织学、生物化学及生物力学测试，结果显示PRF膜片能够有效修复兔关节软骨全层缺损，具有十分良好的临床应用前景。