CRISPR/Cas9敲除Ptgs2对肝星状细胞凋亡的影响

来源 :湖南师范大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:aiming7006x
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:研究敲除HSC-T6细胞Ptgs2基因后对其凋亡的影响,为临床上肝硬化防治探索新策略。方法:将大鼠HSC-T6细胞设置KD组(HSC-T6-Ptgs2-/-细胞)、阴性对照NC组(HSC-T6-NC细胞)和空白对照CON组(HSC-T6细胞)。LV-Ptgs2-sgRNA慢病毒载体转染KD组,LV慢病毒载体转染NC组,CON组常规培养,不做干预。转染72小时后,电子荧光显微镜观察慢病毒转染效果并拍片,计算转染率。转染后72小时、96小时,采用Western blot分别检测三组HSC-T6细胞Ptgs2基因蛋白表达情况。转染5天后Annexin V-APC单染法染色,采用流式细胞技术分别检测三组细胞凋亡率。结果:(1)各组HSC-T6细胞慢病毒转染情况:KD组和NC组细胞均可见绿色荧光,CON组未见绿色荧光,经计算KD组和NC组转染效率在80%以上,慢病毒载体转染成功。(2)各组HSC-T6细胞Ptgs2蛋白的表达情况:KD组细胞LV-Ptgs2-sgRNA慢病毒感染72小时,Ptgs2蛋白表达明显低于NC组、CON组,差异具有统计学意义(P<0.05),NC组与CON组表达无明显差异;转染96小时后,KD组Ptgs2蛋白表达进一步下调,NC组和CON组Ptgs2蛋白明显升高,KD组明显低于NC组和CON组,差异有统计学意义(P<0.01)。(3)转染5天后,Annexin V-APC单染各组细胞,KD组凋亡率明显高于NC组和CON组,差异有统计学意义(P<0.01),NC组高于CON组,两两相比均有显著性差异(P<0.01)。结论:1.靶向敲除Ptgs2基因后可促进HSC-T6细胞的凋亡。
其他文献
以福建省5所高校646名学生为调查对象,采用问卷调查方式,探讨高校体育俱乐部有偿服务的营销策略对学生学习满意度的影响因素。结果显示:高校俱乐部营销策略和4P理论相适应,包
<正>现代认知心理学认为,人在特定领域中有的陈述性知识组块有组织的内在联系起来就形成了图式。因为图式是学习者从类似事件的多次经验中抽取出共同元素,所以对类似事件拥有
高校党校肩负着选拔和培养优秀大学生党员和高校教职工党员的双重使命,加强高校党校廉政教育,增强党员干部廉政建设显得十分重要。当前高校党校廉政教育面临一些现实困难,本
当前我国正处于经济新常态,机遇与挑战并存,企业面临转型与发展,其内部治理以及外部环境优化均离不开会计的角色。由于市场竞争日趋激烈,股份制公司的管理模式日趋完善,因此,
本文分析了当前企业采购管理中存在的问题,并在此基础上,提出了相应的对策,以期推动采购管理创新,提升企业核心竞争力。
风险投资是高科技发展的助推器,对国家经济发展及解决就业问题都有着非常重要的作用。自20世纪80年代风险投资概念由欧美国家传入我国之后,经过了几十年的发展,已取得了长足
目的研究蛋白质营养不良对肺结核患者康复的影响。方法选取在该院2015年6月—2017年6月接受治疗的标准化抗结核药物治疗的患者50例,研究分析蛋白质营养不良对肺结核患者康复
介绍了硬齿面焊接齿轮的特点,具体分析了在制造过程中存在的主要问题,并提出相应解决方案.
钢材贸易类企业特别是以福建周宁地区为代表的钢贸企业在近十年的时间里,一直扮演着举足轻重的角色,曾为长三角、珠三角和沿海地带的经济发展带去了强劲的动力。但作为小微企
当今,随着信息技术的进步,人们的闲暇时间越来越多,如何使闲暇时间更有意义,成了社会所关注的问题,休闲文明时代的到来呼唤闲暇教育。本文在阐述闲暇教育基本概念及其本质的