牡杨水提物对糖尿病小鼠的降糖作用及其相关机制初步研究

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目的:探讨以牡蛎壳及杨桃提取物为主要成分的牡杨水提物对链脲佐菌素诱导的糖尿病小鼠的降血糖活性及可能的机制,为预防或延缓糖尿病的发生、发展提供实验依据。方法:SPF级昆明小鼠,雄性,体重1822g。随机抽取10只作为正常对照组,其余小鼠均以120mg·kg-1链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)行腹腔注射。7d后(小鼠采血前禁食不禁水12 h)尾静脉取血,用罗氏卓越型血糖仪测小鼠空腹血糖(FBG),将FBG≥11.1 mmol·L-1的视为造模成功的糖尿病小鼠。将糖尿病小鼠按血糖值由高到低编号,采用均衡随机法将成模小鼠随机分为模型组,阳性对照组,牡杨高、中、低剂量组,每组10只。造模成功后第2天开始灌胃给药,每天给药一次,连续给药14天。正常对照组和模型组均给予等量生理盐水;阳性对照组用前将药片研磨粉碎,用蒸馏水配制成混悬液,以0.32g·kg-1·d-1灌胃;牡杨高、中、低剂量组分别以20g·kg-1·d-1、10g·kg-1·d-1、5g·kg-1·d-1灌胃。给药期间,每天观察小鼠的精神状态、进食量、饮水量、大小便、毛发改变等一般状况,并记录小鼠体重的变化和死亡情况等。并采集血清、胸腺及脾脏、肝脏、胰腺及肾脏等标本。测定空腹血糖值(FBG)、空腹胰岛素浓度(FINS)、血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量、微量还原型谷胱甘肽(GSH)含量等。观察肾脏、胰腺的HE染色病理切片图,观察Insulin、Bax、Bcl-2免疫组化反应结果。结果:(1)造模前小鼠皮毛干燥光滑,眼珠光亮有神,精神状态良好,行动活跃,饮水、进食及大小便量均正常,垫料干爽。成模后小鼠生长缓慢,体型消瘦,毛发有不同程度脱落、纠结成簇,眼睛暗淡无光,精神萎靡不振,活动量明显减少,饮用水和饲料消耗量显著增多,大小便增加,垫料潮湿且有腐臭味,出现典型的“三多一少”症状。(2)胸腺指数在各组比较的P值是小于0.05,差异具有统计学意义。牡杨高剂量组与牡杨低剂量组比较差异具有统计学意义;牡杨高剂量组、牡杨中剂量组、牡杨低剂量组、阳性对照组、模型组与正常对照组比较差异均具有统计学意义。脾脏指数在各组比较结果,差异不具有统计学意义。(3)INS和降糖率在牡杨高剂量组、牡杨中剂量组剂量组、牡杨低剂量组剂量组、阳性对照组、模型组及正常对照组之间比较的P值均小于0.05,差异有具有统计学意义。对两个指标进行两两比较,其中INS中,牡杨中剂量组、牡杨低剂量组、阳性对照组与正常对照组比较的P值均是小于0.05,差异具有统计学意义,可以认为牡杨中剂量组、牡杨低剂量组、阳性对照组与正常对照组比较均有统计学意义。(4)HDL-C、LDL-C、TC、TG在各组间比较的P值均小于0.05,差异有统计学意义,可以认为各组别在HDL-C、LDL-C、TC、TG这些指标的比较中总体来说是有差异的。牡杨高、中、低剂量组、阳性对照组、正常对照组与模型组之间比较差异具有统计学意义;LDL-C指标中发现牡杨低剂量组、阳性对照组、模型组、正常对照组与牡杨中剂量组比较均是差异具有统计学意义的;TG指标中:牡杨中剂量组、阳性对照组、模型组、正常对照组与牡杨低剂量组比较差异具有统计学意义。其余组别之间比较差异无统计学意义,HDL-C和TG指标中各组别之间的比较P值均大于0.05,差异无统计学意义。(5)SOD、MDA、GSH在牡杨高剂量组、牡杨中剂量组、牡杨低剂量组、阳性对照组、模型组和正常对照组之间比较的P值均小于0.05,差异具有统计学意义,可以认为SOD、MDA、GSH在牡杨高剂量组、牡杨中剂量组、牡杨低剂量组、阳性对照组、模型组、正常对照组之间比较均有差异。SOD中,牡杨中剂量组、牡杨低剂量组、阳性对照组、模型组、正常对照组与牡杨高剂量组比较的P值均小于0.05,差异具有统计学意义,可以认为高剂量的牡杨水提物对SOD的活力有影响。MDA中,牡杨低剂量组、模型组、正常对照组与牡杨高剂量组比较的P值均是小于0.05,差异具有统计学意义,可以认为高剂量的牡杨水提物可以增加MDA的含量。GSH中,牡杨中剂量组、阳性对照组、模型组、空白与牡杨高剂量组比较的P值均小于0.05,差异具有统计学意义。结论:(1)牡杨水提物能抑制链脲佐菌素诱导的糖尿病小鼠血糖升高,提高机体对胰岛素的敏感性。提示牡杨水提物对链脲佐菌素诱导的小鼠高血糖的形成、胰岛的损伤有一定的保护作用。(2)牡杨水提物可提高糖尿病小鼠血清SOD活性和GSH含量,并能提高糖尿病小鼠的脾脏指数和胸腺指数。提示牡杨水提物具有清除自由基、提高机体抗氧化能力和增强免疫功能的作用。
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