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胫骨软骨发育不良(TD)是肉鸡常见的骨骼性疾病,引发家禽一系列疾病和亚健康状态。谷胱甘肽硫转移酶A3(GSTA3)是GSTs家族成员,主要参与机体的解毒,以及氧化应激相关信号通路的调节。课题组前期研究发现,TD肉鸡胫骨生长板软骨细胞发生凋亡,在此研究基础上,本试验将重组GSTA3蛋白注射到肉鸡体内,以期探明重组GATA3蛋白对肉鸡TD胫骨生长板中凋亡相关基因的影响,为TD的缓解寻找新的防治方法。本试验利用福美双诱发模式建立肉鸡TD模型,并利用课题组前期重组鸡GSTA3蛋白技术,制备活性重组蛋白。将180羽1日龄AA肉仔鸡预饲一周后随机分为6(A、B、C、D、E和F)组,在8和9日龄对D、E和F组饲喂添加100 mg.kg-1福美双的日粮,并对基础日粮(A、B和C)组和福美双处理(D、E和F)组肉鸡各分对照(A和D)组、重组GSTA3蛋白低剂量(20μg·kg-1)注射(B和E)组和高剂量(50μg·kg-1)注射(C和F)组,在试验第8、10、12和14d分别对低剂量组和高剂量组肉鸡腿部肌肉注射重组GSTA3蛋白,对照组注射稀释用PBS。在饲喂福美双后第1、2、4、6、10和15d分别采集胫骨生长板,通过TD评分和HE方法鉴定模型是否建立成功。利用ELISA方法对肉鸡血清中Bcl-2的含量进行测定,通过Real-time PCR对肉鸡胫骨生长板中 Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-6、MDM2、p53、BAG-1、BAG-3、G0S2、HD AC 1、H4、PCN A 和STAT3基因的mRNA转录水平进行检测,同时通过免疫组织化学技术对Bax和PCNA进行蛋白水平分析。ELISA结果显示,福美双对照(D)组肉鸡血清中Bcl-2的浓度在第1和6天升高,而在第15天却显著下调(P<0.05);高剂量的重组GSTA3蛋白显著上调第2和6天C组肉鸡血清中Bcl-2的水平,并显著上调第4和6天F组肉鸡血清中Bcl-2的水平。Real-time PCR结果显示,高剂量的重组GSTA3蛋白显著上调F组肉鸡生长板中Bcl-2(第2,4,6和15天)、MDM2(第1、2、4和10天)和H4(第2,6和10天)基因mRNA的表达量(P<0.05),同时显著降低Caspase-6(第1,2,10和15天)和G0S2(第4和10天)基因mRNA的表达量(P<0.05)。低剂量的重组GSTA3蛋白显著上调E组肉鸡生长板中BAG-3(第4和(6天)和STAT3(第1,2和4天)基因mRNA的表达量(P<0.05),同时显著降低 Bax(第 1,2 和 6 天)、Caspase-3(第 1,2,4,6,10和15天)、PCNA(第1,4和10天)和STAT3(第6,10和15天)基因mRNA的表达量(P<0.05)。低剂量和高剂量的重组GSTA3蛋白均显著上调E和F组肉鸡生长板中p53(第6,10和15天)和BAG-1(第10和15天)基因mRNA的表达量(P<0.05),同时显著降低HDAC1(第4和10天)基因mRNA的表达量(P<0.05)。免疫组化结果显示,Bax在生长板增殖区和前肥大区不表达,在肥大区细胞质中表达,重组GSTA3蛋白降低第2、4和6天基础日粮组肥大区的蛋白表达,并降低第6天福美双处理组肥大区的蛋白表达水平;PCNA在肥大区细胞核高表达,增殖区和前肥大区表达较少,重组GSTA3蛋白降低第6、10和15天基础日粮组肉鸡生长板增殖区和前肥大区的蛋白表达,并且在第2天降低福美双处理组肥大区的蛋白表达水平。福美双诱导的肉鸡TD生长板凋亡水平明显增加,重组GSTA3蛋白参与了软骨细胞凋亡调控途径,对软骨细胞凋亡具有一定的缓解作用。