斑蝥酸钠对膀胱癌患者树突状细胞的影响及对BIU-87细胞增殖、凋亡的影响

来源 :郑州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kwl9970024
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
背景泌尿系统肿瘤是指发生于泌尿系统任意部位的肿瘤。由于尿液在膀胱内停留时间最长,所以膀胱癌也最为常见。膀胱癌是全身十大肿瘤之一。世界范围内,膀胱癌位列男性最常见实体瘤的第四位,在女性位列第七位,在我国,膀胱癌目前仍是最常见的泌尿系统恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率占我国泌尿生殖系肿瘤发病率的第一位,其中最常见的是膀胱尿路上皮癌,约占膀胱癌患者总数的90%以上,其中大多数起源于移行上皮。近年来,随着工业化,城镇化,老龄化的加速,我国膀胱癌的发病率总体呈逐年上升趋势,应给予重视。近年来随着中医药物制剂专业的发展,很多中药材的抗肿瘤作用被挖掘出来,使更多的中药材及其衍生物应用于肿瘤的治疗。斑蝥是一种传统的中药材,其主要有效成分是斑蝥素(Cantharidin),斑蝥素对肿瘤细胞具有很好的亲和性,同时也具有刺激性毒性,对泌尿系统有严重的刺激作用,其严重的毒性限制了其在临床上的应用。斑蝥酸钠(Sodium cantharidate)是斑蝥素与氢氧化钠共热时水解生成的一种半合成药物,分子式为C10H12Na2O5,相比于斑蝥素,斑蝥酸钠的毒性与刺激性都更小,更易进入细胞,抗肿瘤作用也更强。目的:探讨斑蝥酸钠对膀胱癌患者外周血来源的树突状细胞分化成熟及其功能的影响,并研究斑蝥酸钠对膀胱癌细胞BIU-87增殖、凋亡的影响。方法:(一)1.以中晚期膀胱癌患者和健康成人外周血为研究对象,通过采用Ficoll paque plus淋巴细胞分离液分离外周血单核细胞,分别培养获取树突细胞和淋巴细胞。实验设计分成以下组别:(1)空白对照组;(2)斑蝥酸钠低剂量组(10μg/ml);(3)斑蝥酸钠中剂量组(20μg/ml);(4)斑蝥酸钠高剂量组(40μg/ml);(5)健康人组。2.通过流式细胞术检测树突状细胞表面分子CDla和CD83表达量的变化。3.通过MTT法检测斑蝥酸钠对树突状细胞刺激淋巴细胞增殖的影响。(二)1.斑蝥酸钠对膀胱癌BIU-87细胞的作用,实验设计分成以下组别:(1)空白对照组;(2)斑蝥酸钠低剂量组(10μg/ml);(3)斑蝥酸钠中剂量组(20μg/ml),通过MTT法检测斑蝥酸钠对膀胱癌BIU-87细胞的作用。2.通过集落形成实验检测斑蝥酸钠对膀胱癌BIU-87细胞克隆能力的影响。3.通过AnexinV-FITC/PI双染流式细胞术检测斑蝥酸钠对膀胱癌BIU-87细胞凋亡的影响。4.通过流式细胞术检测斑蝥酸钠对膀胱癌BIU-87细胞线粒体膜电势的影响。5.通过流式细胞术检测斑蝥酸钠对膀胱癌BIU-87细胞的自噬作用的影响。6.通过Western blot法检测膀胱癌BIU-87细胞Caspase-3和PARP蛋白表达的变化。结果:(一)1.与对照组相比,斑蝥酸钠处理组外周血单核细胞体积变大,细胞变长,斑蝥酸钠高剂量组,细胞出现突起,形如树枝,和健康人组的细胞形态类似。2.在斑蝥酸钠高剂量组,树突状细胞表型分子CD83,CDla的表达最高。与对照组组相比,斑蝥酸钠处理组树突状细胞膜表面分子CD83和CDla表达增高,并且均有明显差异(p<0.05)。3.斑蝥酸钠处理组刺激异体淋巴细胞增殖指数显著高于对照组,差异具有统计学意义(p<0.05)。(二)1.MTT法证实斑蝥酸钠能明显抑制膀胱癌细胞株BIU-87的生长。2.集落形成实验,随着斑蝥酸钠的浓度增大,克隆集落形成的数目逐减减少,与浓度呈负相关。3.斑蝥酸钠作用24h后,流式细胞术双染法检测细胞凋亡显示斑蝥酸钠可使BIU-87细胞发生凋亡。4.通过流式细胞仪检测斑蝥酸钠对膀胱癌BIU-87细胞的线粒体膜电位实验,表明斑蝥酸钠能显著的诱导膀胱癌BIU-87细胞线粒体膜发生崩溃,膜电位显著降低,并随着药物的浓度的增大膜电位下降越明显。5.通过流式细胞术检测斑蝥酸钠对膀胱癌BIU-87细胞的自噬作用,表明不同浓度斑蝥酸钠能诱导细胞发生自噬,并随着浓度提高自噬作用逐渐增强,并且与药物浓度呈正相关。6.Western blot法检测显示斑蝥酸钠使膀胱癌BIU-87细胞中Caspase-3和PARP蛋白表达明显增加。结论:斑蝥酸钠能够诱导膀胱癌患者树突状细胞成熟,促进淋巴细胞的增殖能力;斑蝥酸钠能够抑制膀胱癌BIU-87细胞的增殖,并能够诱导细胞发生凋亡。
其他文献
目的:本研究以慢性胆囊炎患者治疗前后症状、体征评定积分的改变为主观指标,以治疗前后B超检查所示胆囊壁厚度、毛糙和透光的改变情况为客观指标,对比观察耳穴贴压结合体针治
在情绪研究中,情绪诱发是关系到实验能否顺利进行、实验过程能否良好控制、实验结果能否准确预估的重要问题,标准化情绪刺激材料的出现为这个问题的解决带来了保证。面孔表情
永续债作为一种新型融资工具,它既不同于债务融资,又区别于股权融资,是介于两者之间,具有较大的灵活性和适用性,文章对永续债这种融资工具的相关内容开展讨论。
采用荧光原位杂交技术(FISH)对24枚冷冻胚胎以及38枚不适合移植的废弃胚胎的8种染色体(13、16、18、21、22、15、x和Y)分两轮行植入前遗传学筛查(PGS),以分析胚胎形态学与染色体异常
目的探讨舒适护理干预对糖尿病性视网膜病变患者手术期遵医行为的影响。方法将150例患者随机分为对照组和干预组,每组各75例。对照组给予手术期的常规护理,干预组除常规护理
2010版《血液净化标准操作规程》中对回血方法有基本方法和密闭式回血法两种建议,在血液净化结束时推荐使用密闭式回血法[1]。但使用现有的管路进行下机回血时,却不能实现不
《义务教育语文课程标准》指出,低年级学生的阅读目标是借助读物中的图画阅读。i本文从以图增趣,感知文本;以图入境,深入文本;以图延伸,启发想象三方面来阐述部编教材插图在
本文主要从上市公司粉饰报表、内部代理问题加剧和中介机构未尽责三个层面阐述我国上市公司IPO效应的动因,并给出相应思考和建议,以期能够保障投资者的合法权益,共同推进我国
机动车交通事故责任纠纷案件伴随着社会经济发展和机动车数量增加而呈急剧上升趋势。在诉讼过程中,商业三者险中非医保用药费用理赔问题往往成为案件的争议焦点,由于法律法规及司法解释层面缺乏明确的规定,学界和实务界亦没有形成共识,各地法院对该问题的处理观点不一,从而出现了同案不同判的现象。非医保用药免赔条款,指的是保险人与投保人在签订机动车第三者责任商业保险合同所约定的,保险人对受害第三人治疗中超出国家基本
成都城市的历史,如果以公元前311年第一次筑成都城垣的正式记载作为起点,到今刚好是二千三百周年。两千三百年前,成都城市在灿烂的古蜀文化的基础上孕育诞生。它一经出现,就