漆树(Rhus verniciflua)是我国重要的经济林树种,生漆是从漆树分泌的天然树脂,素有“涂料之王”的美誉。漆树的化学研究主要集中在生漆及漆籽等方面,而漆树枝桠茎材黄酮活性物的研究很少。因此本文将开展漆树黄酮化合物(RVF)的提取、分离、高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)特征、化学结构及其抑制酪氨酸酶和抗氧化活性研究,为我国漆树资源的综合开发利用提供应用基础。主要研究内容与结果如下:(1)漆树中具有高效抗氧化活性关键组织部位的筛选以漆树的叶、枝条、树皮、籽和木质茎材为原料,分析不同部位中总多酚、黄酮、单宁、漆酚和总多糖的含量差异及不同部位醇提取物和水提取物的抗氧化活性,结果表明:漆树叶醇提取物的多酚、单宁和漆酚含量最高,分别为42.51%、25.53%和9.19%。木醇提取物的黄酮含量最高,为17.52%。漆树叶水提取物的多糖含量最高,为30.49%。各组织部位醇提取物的抗氧化活性显著高于水提取物,绿叶、黄叶和木醇提取物的抗氧化活性较其它部位高。通过对各部位的含量和抗氧化活性的比较分析,筛选出黄酮含量最高和抗氧化活性较好的漆树木进行后续研究。(2)漆树黄酮的分离与结构表征利用负压提取方法,以总黄酮得率和抑制酪氨酸酶活性为指标,通过单因素试验和Box-Behnken试验设计方法,优化了漆树黄酮负压提取的工艺条件。采用不同极性溶剂逐级萃取漆树木醇提取物(RVWEE)。利用HPLC-MS、快速分离色谱(FC)和制备高效液相色谱(Pre-HPLC)从EAE表征得到7种黄酮化合物,分别为黄颜木素、漆黄素、硫黄菊素、3,4′,7-三羟基二氢黄酮醇、3,7-二羟基黄酮醇-4′-鼠李糖苷、槲皮素和紫铆花素。除此,鉴定了没食子酸、对乙氧基3-羟基苯甲酸、3,4-二羟基杏仁酸、没食子酸十六烷酯、原儿茶酸、没食子酸乙酯、1-棕榈酸-2,3-乙酸甘油酯和苯丙酸庚酯。其中没食子酸十六烷酯、对乙氧基3-羟基苯甲酸、1-棕榈酸-2,3-乙酸甘油酯、苯丙酸庚酯和3,7-二羟基黄酮醇-4′-鼠李糖苷首次从漆树木中鉴别。(3)漆树不同部位提取物抑制酪氨酸酶活性及机理通过比较漆树不同部位的提取物、溶剂萃取物及RVF对酪氨酸酶的抑制作用筛选漆树中具有高效抑制作用的黄酮化合物。结果表明,EAE抑制酪氨酸单酚酶的IC50值为308mg/L,对单酚底物的催化作用具有一定的迟滞性,对二酚酶的抑制作用表现为混合型。RVF表现良好抑制酪氨酸酶活性,由强到弱的顺序为:硫黄菊素>紫铆花素>槲皮素>漆黄素>黄颜木素>3,4′,7-三羟基二氢黄酮醇。RVF(漆黄素、紫铆花素和硫黄菊素)抑制酪氨酸酶活性的机理研究结果表明:黄酮化合物对多巴色素的形成有较强的抑制作用,对单酚酶的抑制效应表现为延长酪氨酸酶催化反应的迟滞时间;3种黄酮化合物对酪氨酸二酚酶活性的抑制分别表现为竞争型、非竞争型和竞争型,化合物对游离酶的抑制常数KI分别为261.76 mmol/L、3.08 mmol/L和72.40 mmol/L;紫外光谱(UV)显示RVF与酪氨酸酶发生了相互作用,但并没有与酪氨酸酶活性中心的Cu2+发生作用。(4)漆树黄酮化合物的抗氧化活性利用体外实验方法,对EAE以及RVF的抗氧化活性进行系统研究。EAE对DPPH自由基、ABTS自由基和羟自由基具有较强的清除作用,其IC50值分别为19.90 mg/L、29.74 mg/L和37.95 mg/L。总还原能力和三价铁离子的还原能力与EAE浓度呈现线性正相关。RVF具有良好的抗氧化活性,由强到弱的顺序为:槲皮素>漆黄素>硫黄菊素>紫铆花素>黄颜木素>3,4′,7-三羟基二氢黄酮醇。其中槲皮素、漆黄素和硫黄菊素清除自由基的能力高于Vc和BHT。