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目的:
研究Treg和Th17细胞在食管鳞癌患者体内的表达情况,分析Treg和Th17细胞表达水平与各临床及病理指标间的关系,了解食管鳞癌中是否存在Treg和Th17细胞的失衡表达,并初步探讨其可能机制,以期获得对临床的指导意义。
方法:
分离食管鳞癌患者外周血单个核细胞(PBMC)、癌旁组织浸润淋巴细胞(NIL)及癌组织内浸润淋巴细胞(TIL);通过流式细胞术检测食管鳞癌患者外周血、癌旁组织及癌组织内Treg和Th17细胞在CD4+T淋巴细胞中的比例,分析Treg/Th17比值变化,探讨Treg和Th17细胞表达水平及Xreg/Th17比值变化与各临床及病理指标间的关系:通过实时荧光定量PCR技术检测转录因子FoxP3、RORrtmRNA的表达水平,运用直线相关法对Foxp3/RORrt比值与Treg/Th17比值进行相关性分析;通过ELISA技术检测血浆中细胞因子TGF-β1、IL-17的表达水平。
结果:
1)食管鳞癌患者外周血中Treg、Th17细胞比例,转录因子FoxP3、RORrtmRNA表达水平,细胞因子TGF-β1、IL-17浓度均升高;早期患者外周血中Treg、Th17、FoxP3、RORrt、TGF-β1、IL-17表达及Treg/Th17、Foxp3/RORrt比值与健康志愿者比较无统计学意义(P＞0.05);进展期患者外周血中Treg、Th17、FoxP3、RORγt、TGF-β1、IL-17表达及Treg/Th17、Foxp3/RORγt比值与健康志愿者及早期患者比较有统计学意义(P＜0.05);
2)进展期食管鳞癌患者外周血、癌旁组织、癌组织中Treg、Th17细胞比例及FoxP3、RORγtmRNA表达均升高,且癌组织＞癌旁组织＞外周血,其组间差异具有统计学意义(P＜0.05),但Treg/Th17比值及Foxp3/RORrt比值在外周血、癌旁组织、癌组织中相互比较无统计学意义(P＞0.05);
3)食管鳞癌患者外周血中Treg细胞、Th17细胞、Treg/Th17比值与患者的年龄、性别及肿瘤位置、病变长度、分化程度、浸涧深度无关(P＞0.05);但与淋巴结转移及pTNM分期有关(P＜0.05):
4)进展期食管鳞癌患者癌组织中Foxp3/RORγt比值与Treg/Th17比值之间呈正相关(R2=0.581,r=0.762,P＜0.01)。
结论:
此研究证实了食管鳞癌患者肿瘤微环境中Treg和Th17细胞高表达,推测Treg和Th17细胞可能参与了食管鳞癌的病程进展。进展期食管鳞癌患者体内Treg/Th17细胞表达失衡,转录因子Foxp3/RORγt表达失衡可能是Treg/Th17细胞表达失衡的机制之一。这些结果为我们进一步研究Treg/Th17细胞在食管鳞癌发生、发展中所起的作用提供实验依据,并为食管鳞癌的免疫治疗提供新的思路。