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痢疾杆菌是细菌性痢疾的致病菌。LPS-O多糖和Ipa蛋白是其菌膜上两类重要的毒力相关抗原分子。既往研究发现分别单独表达这两类抗原的克隆株或突变株均无毒力，只有两类抗原都完整表达的毒株才能引起豚鼠角结膜炎（Ser+），引起人痢疾杆菌感染。本研究室以痢疾杆菌F2a-12菌膜的不同纯化组份为免疫原，获得了抗LPS-O多糖，包括抗型Ⅱ、群3、4的3A6和抗群3、4的1G8、2A3以及抗IpaB蛋白的单克隆抗体。这两类抗原的单抗对痢疾杆菌的致病性有无阻断作用?这正是本课题的研究目的。 本研究以抗hCD44的单抗681作为与菌膜抗原无关的单抗对照，以接触性溶血、入侵HeLa细胞及豚鼠角结膜炎等生物表型与细胞和动物为模型，通过透射、扫描电镜及激光共聚焦显微镜等技术与方法，来观察不同类型的单抗对LPS-O多糖和IpaB蛋白两种重要毒力相关抗原分子生物活性的影响，对F2a-12入侵HeLa细胞及其对细胞骨架的影响进行了形态学观察，研究发现：1．抗LPS-O多糖即识别型Ⅱ、群3、4抗原的单抗3A6能有效地阻断痢疾菌毒株的接触性溶血活性，识别IpaB的单抗无明显阻断活性；2．抗LPS-O多糖单抗3A6和抗IpaB单抗17G2均不能阻断痢疾杆菌入侵HeLa细胞，反能明显促进痢疾杆菌毒株入侵HeLa细胞，提高了痢疾菌的细胞感染率和入侵菌数，同时发现在入侵过程中HeLa细胞的细胞骨架发生了显著重排；3．上述两种单抗加重了F2a-12对豚鼠角膜的炎症反应；4．抗CD44单抗能明显阻断痢疾杆菌入侵HeLa细胞。从不同角度、不同层次的研究结果首次表明S.flexneri-2a菌膜上的LPS与入侵HeLa细胞相关。本研究对痢疾杆菌不同菌膜抗原在该菌免疫保护及致病中的作用有了新的认识，为构建新型痢疾杆菌疫苗提供重要参考资料。 机体95％以上的感染发生在粘膜或由粘膜入侵，因此粘膜免疫日益受到重视。既往研究中发现不同粘膜免疫途径诱导不同粘膜部位的免疫反应有强弱之分，鼻免疫比胃肠免疫能诱导更强的粘膜免疫反应与系统免疫反应。为揭示共同粘膜免疫系统产生的机制，淋巴细胞的归巢和再循环成为当今免疫学的研究热点之一。本研究的第二部分，通过痢疾杆菌不同粘膜途径（灌胃、滴鼻）感染小鼠，检测不同组织中α4与MAdCAM-1的表达及不同粘膜部位淋巴细胞表面黏附分子CD44、CD54的变化，比较不同粘膜途径感染后诱导黏附分子表达变化的规律。结果发现：滴鼻途径感染痢疾杆菌后48小时，除在MLN及PP部位有较对照组高的α4及MAdCAM-1表达外，在生殖道粘膜中还发现了MAdCAM-1分子的异常高表达，表明滴鼻感染后效应细胞有效地归巢至不同粘膜部位，不仅影响了局硕士学位论文中文摘要部的粘膜免疫系统，还能明显诱导生殖道粘膜免疫反应的原因是与。;、MAdcAM一1在相关部位的表达有关。同时发现淋巴细胞表面CD44和CD54的表达随感染途径的不同而变化。该研究为深入研究粘膜免疫细胞移行规律及其调控机制提供了实验资料。