【摘 要】
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目的:本文以小鼠巨噬细胞系(RAW264.7)为研究对象,人源氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)孵育细胞,探讨纤维连接蛋白(Fibronectin,FN)是否通过诱导内质网应激(ERS)影响ox LDL作用下泡
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目的:本文以小鼠巨噬细胞系(RAW264.7)为研究对象,人源氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)孵育细胞,探讨纤维连接蛋白(Fibronectin,FN)是否通过诱导内质网应激(ERS)影响ox LDL作用下泡沫细胞的形成。方法:人源ox-LDL孵育RAW264.7细胞,western blot检测FN、葡萄糖调节蛋白-78(GRP78/bip)的表达,RT-PCR检测FN基因表达水平变化;Western blot检测FN基因沉默及内质网应激抑制剂PBA在ox-LDL诱导细胞后FN、GRP78/bip蛋白的表达变化;ELISA检测ox-LDL孵育后细胞培养液中FN的含量;免疫荧光法检测FN沉默后细胞对ox-LDL的体外摄取情况。结果:人源ox-LDL孵育RAW264.7细胞12h后FN和GRP78/bip蛋白表达水平上调(P<0.05),FN基因表达上调(P<0.05);加入内质网应激抑制剂PBA孵育细胞6h再加入ox-LDL孵育12h后,FN蛋白表达上调作用不受影响(P<0.05),但抑制了GRP78/bip蛋白的上调作用;将FN基因沉默后再加入ox-LDL孵育细胞12h,与对照组相比,FN和GRP78/bip蛋白的上调作用均受抑制;将FN基因沉默后,细胞对ox-LDL的摄取量下降。结论:FN参与ox-LDL作用下的泡沫细胞形成,其机制可能与触发ERS有关。
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