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前言胃癌是我国常见的消化道恶性肿瘤,其发生是一个多阶段,多因素的发展过程,在肿瘤的发生过程中细胞增殖和凋亡的失衡是导致其无限制生长的重要因素。近年来,有关细胞凋亡在肿瘤发生,发展中的作用越来越受到重视。细胞凋亡又称细胞程序性死亡(PCD),肿瘤的发生与控制细胞增殖的癌基因的过度表达有关,也与抑制细胞凋亡基因的高表达及诱导细胞凋亡的抗癌基因变异失活有关。细胞凋亡机制被不适当地终止是细胞癌变的重要前提,凋亡过程的受抑对肿瘤的发生发展起重要作用。Caspase-3,Bim及c-Cbl是与胃癌发生及预后密切相关的三个指标。Caspase-3是Caspase家族中重要成员,是细胞凋亡发生机制中最关键的效应分子,参与细胞的生理及病理性死亡过程,在凋亡研究中倍受关注,但其与肿瘤生物学行为关系的研究尚少。Bim是Bcl-2家族中仅含有一个BH3结构域的蛋白,具有促凋亡的活性,并具有肿瘤抑制因子活性,其生理作用与它调节细胞凋亡的功能有关。c-Cbl是Cbl家族的重要成员,可介导受体和非受体酪氨酸激酶的降解,并作为泛素连接酶E3负性调节蛋白质的活性,与细胞凋亡相关。联合检测它们在胃癌组织中的表达,国内外尚未见报道。本研究旨在探讨联合检测Caspase-3、Bim和c-Cbl在胃癌组织中的表达及其临床意义。材料与方法1、病例和标本124例胃癌石蜡标本来自于中国医科大学附属第一医院和辽宁省肿瘤医院2005年10月～2006年8月接受胃大部切除术的病人,患者术前均未接受化疗;其中男92例,女32例;年龄24～85岁,中位年龄60岁;病理均为腺癌;高分化11例,中分化29例,低分化84例;侵犯肌层76例,侵犯浆膜层48例;发生淋巴结转移100例;TNM分期:Ⅰ期17例,Ⅱ期46例,Ⅲ期37例,Ⅳ期24例。124例胃癌组织取其中24例距胃癌组织5厘米以远的正常组织作为对照。2、试剂兔抗人Caspase-3多克隆抗体购自Santa Cruz公司,鼠抗人c-Cbl单克隆抗体购自BD公司,兔抗人Bim多克隆抗体、S-P检测试剂盒、DAB显色液均购自福州迈新生物技术开发有限公司。3、方法将124例胃癌标本与24例正常胃组织标本制作成组织芯片,采用免疫组化S-P法,按照S-P检测试剂盒说明书所示步骤进行,切片经柠檬酸缓冲液(PH=6.0)高压热修复预处理。4、结果判定Caspase-3和Bim均以胞浆内出现棕黄色颗粒为阳性染色,c-Cbl以胞膜及胞浆出现棕黄色颗粒为阳性染色,参照文献根据染色阳性细胞数和染色强度分别评分,两者乘积0～1分确定为阴性,2～4分确定为弱阳性,≥5分确定为强阳性。5、统计分析方法采用SPSS13.0软件,进行x~2检验、Spearman秩相关检验和Fisher精确计算概率法,以P＜0.05为差异有统计学意义。实验结果1、Caspase-3、Bim和c-Cbl在胃癌组织中的阳性表达Caspase-3和Bim在胃癌组织中的阳性表达率分别为45.2%、37.9%;c-Cbl在胃癌组织中的阳性表达率为71.0%。2、胃癌组织中Caspase-3、Bim和c-Cbl的表达情况与胃癌临床病理特征的关系Caspase-3的阳性表达随组织分化程度增高而增强(P＜0.05);Bim的阳性表达随TNM临床分期和浸润深度而降低(P＜0.05);c-Cbl阳性表达随TNM临床分期和浸润深度而增高(P＜0.05)。3、胃癌组织中Caspase-3、Bim和c-Cbl表达之间的相关性Caspase-3和Bim的表达呈正相关(r_s=0.403,P＜0.05),而Caspase-3,Bim和c-Cbl的表达均呈负相关(r_s=-0.185,r_s=-0.442,P＜0.05)。结论1、Caspase-3和Bim在胃癌中呈低表达,c-Cbl在胃癌中呈高表达。2、Caspase-3的阳性表达与组织分化程度有关,Bim和c-Cbl的阳性表达与TNM分期和浸润深度有关,三者均与性别、年龄、淋巴结转移无关。3、Caspase-3和Bim的表达呈正相关,而Caspase-3,Bim和c-Cbl的表达均呈负相关。