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甜菜夜蛾[Spodoptera exigua(Hbner)]是一种重要的世界性蔬菜害虫,对菊酯类和有机磷类化学农药产生了很高的抗性;而相比一些敏感昆虫而言,甜菜夜蛾对苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis,简称B.t.)不敏感,另一方面个别品系又产生了抗性。因此缺少高效有毒菌株是B.t.制剂广泛运用于甜菜夜蛾防治的严重制约因素,不断地寻找对甜菜夜蛾具有高毒力的B.t.菌株十分必要。此外,高效毒力B.t.菌株的筛选及其毒力特性的研究对合理轮换使用不同类型的菌株,以降低选择压力、延缓抗性的发展,也具有很重要的现实意义。 本研究首先从23株出发菌株中筛选出对甜菜夜蛾1日龄幼虫有较高毒力的菌株5株,经过多轮次摇瓶复筛,选出对甜菜夜蛾具有最高毒力的菌株YL-17,其48小时摇瓶发酵液对甜菜夜蛾1日龄幼虫的LC50为1.57ul/ml。接着运用液体双相分离法,纯化YL-17的晶体与芽孢;取其发酵液及纯化晶体进行SDS-PAGE凝胶电泳,测定菌株的晶体含量、晶体蛋白的分子量,研究该菌株的晶体蛋白特性,其晶体含量为5.2ug/ul,晶体蛋白质的分子量分别为68.5kDa、76.3kDa、91.9kDa和130.8kDa。晶体、芽孢、及二者不同比例混合物对甜菜夜蛾1日龄幼虫的毒力研究表明该菌株的毒力主要来源于晶体,但其芽孢也有部分毒力;且芽孢与晶体在总浓度相同的情况下以不同比例相混合的实验结果表明,芽孢与晶体的比例为1:1时芽孢对杀虫晶体蛋白的毒力有很好的增效作用;纯化晶体、芽孢及孢晶混合物感染甜菜夜蛾1日龄幼虫后,其48小时的LC50分别为:22.06ug/ml、230.18ug/ml、20.23ug/ml。 菌株YL-17对甜菜夜蛾生长发育的影响研究表明:该菌株的毒素对虫卵的孵化率无明显影响,但影响初孵幼虫的存活率;甜菜夜蛾幼虫的存活率随B.t.处理浓度的下降而上升;3龄幼虫的生长量随B.t.处理浓度的下降而呈上升趋势;处理组中除在60ug/ml和120ug/ml浓度下没有幼虫完成整个发育外,在30ug/ml、15ug/ml、7.5ug/ml、3.75ug/ml处理浓度下幼虫发育历期随浓度的增加而延长;除在3.75ug/ml处理浓度下,化蛹率、羽化率和成虫产卵量与对照没有显著差异外,处理组30ug/ml、15ug/ml、7.5ug/ml浓度与对照组有显著差异(P<0.05),且随浓度的增加化蛹率、羽化率有下降趋势;处理组(浓度3.75ug/ml)与对照组在成虫产卵量上的结果表明:B.t.药液对甜菜夜蛾雌虫的平均产卵量没有显著的影响,但对雌虫产卵高峰期的到来有一定的延迟作用;研究还表明B.t.毒素对甜菜夜蛾幼虫的雌雄性发育没有影响,雌性与雄性甜菜夜蛾对苏云金杆菌的敏感性无差异。 发酵上清液对菌株本身的毒力有很好的增效作用,未移走任何上清液时(上清液浓度为100%),LC50为1.63ul/ml,而移走全部上清液时(上清液浓度为0%),即孢晶混合物的LC50为4.1ul/ml。换而言之,即对同一标准品而言,含有全部上清液的发酵液的毒力是发酵液中上清液浓度为0%时毒力的2.52倍。菌株YL-17与几种化学农药单剂米满、毒死蜱、功夫、除尽分别混配的试验表明:与YL-17具有最好联合毒力作用的化学农药单剂是除尽,二者间的最佳混配比例为l.2:3,其72小时的LC。。为5.02mg/L。