重要食品掺假检测技术研究鱼糜制品中主料含量的测定(荧光PCR法)

来源 :复旦大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:nihaoyuyue2009
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市场上鱼糜制品的生产企业较多,产品的价格也因其主料(鱼肉)的成分和含量高低而不同,然而有些不法商贩添加很少的主料或不添加主料,却冠以鱼糜制品(如鱼丸)的名称进行销售以牟取较高的利润。监管部门必须具备有效的技术平台去规范销售市场,保护消费者的利益。但是目前国内外均无对鱼糜制品中主料含量测定的相关检测技术,本研究所建立的检测方法能填补鱼糜制品中主料含量测定的检测技术空白,并为其他相关产品主料含量的测定提供一定的参考依据。目前应用于食品检测的实时荧光定量PCR技术主要有以下两种方法:1、Sybr GreenⅠ染料法和Taqman探针法。本研究通过大量的实验比较了两种不同的实时荧光定量PCR的检测方法,最终选择适合本研究且成本较低的Sybr GreenⅠ荧光染料定量PCR法对鱼糜制品中主料成分进行定量分析。该方法主要是寻找鱼类特异性引物作为外源基因以及同时能扩增动物源性和植物源性成分的通用引物作为内参校正基因对鱼糜制品标准品建立标准曲线,利用标准曲线计算出鱼糜制品中主料成分的质量百分数。本研究建立的方法线性程度良好(R2>0.985)、回收率为88.0%-107.0%、检出限为0.05%,所建立的线性模型均符合检测方法学要求,并在实验室模拟环境下获得了较为可靠的数据结果,从而证明了本方法在实验室条件下的可行性。考虑到市场上不同鱼糜制品制作工艺的不同,本研究在检测方法的具体适用性和最终的实际应用方面仍有待继续探索。
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