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目的随着漂白剂、激光和树脂的广泛应用,口腔治疗能通过多种方式引起牙髓细胞氧化应激,对其造成伤害。然而目前临床上常用的盖髓剂不具有抗氧化作用,且可能引起牙髓炎症和牙本质桥疏松。为了在治疗过程中抑制细胞氧化应激反应,并促进牙髓修复,本研究通过文献复习和预实验发现了原花青素（Proanthocyanidins,PA）这一具有潜力的抗氧化型盖髓剂,并观察了PA对人牙髓细胞（Human dental pulp cells,HDPCs）活性和成牙本质分化的影响。此外,为了探讨原花青素调控修复性牙本质形成的机制,本研究对矿化相关的Wnt/β-Catenin信号通路在牙髓细胞矿化中的调控作用进行了评估。方法1.改良组织块法获得人牙髓细胞后,采用过氧化氢（H2O2）作为诱导剂建立HDPCs氧化应激模型并通过流式细胞术检测细胞状态。通过CCK-8法观察不同浓度PA对HDPCs增殖活性的影响以及过氧化保护作用。2.选择毒性较小的PA浓度处理细胞,通过测定碱性磷酸酶活性,矿化相关基因表达情况以及钙结节染色的方法评估PA对牙髓细胞体外矿化的影响。3.PA预处理细胞复合材料载体后,观察HDPCs在裸鼠体内形成牙本质样结构的情况。4.通过Western blot技术检测PA与Wnt通路抑制剂Dkk-1对HDPCs通路关键分子β-catenin表达的影响,观察Wnt信号通路的激活情况。5.使用成功干扰Wnt信号通路激活的抑制剂处理条件作用于HDPCs后,再检测PA对HDPCs矿化的影响。结果1.20,50μmol/L H2O2处理细胞4h诱导细胞凋亡而100μmol/L H2O2处理4h诱导大量细胞坏死,5-20mg/L的PA对HDPCs活性无明显影响,且能抑制H2O2引起的细胞活性降低。2.PA在5-20mg/L范围内随着浓度增加,促进HDPCs碱性磷酸酶活性增强,矿化基因表达水平提高以及钙结节形成增加。3.20mg/L的PA促进HDPCs在裸鼠背部皮下形成牙本质样结构。4.PA能够上调HDPCsβ-catenin的表达,且在30分钟达到高峰;300μg/L的Dkk-1作用于细胞2h,能够抑制PA引起的β-catenin上调。5.采用Dkk-1作用于HDPCs后,PA促进HDPCs矿化的效应减弱。结论1.H2O2能够诱导牙髓细胞凋亡和坏死,对牙髓细胞产生损伤。2.5-20mg/L的PA对HDPCs不具有明显毒性且能够对氧化应激的HDPCs起到保护作用。3.PA能够促进HDPCs体外成牙本质分化。4.PA能够促进HDPCs在动物体内形成牙本质样结构。5.Wnt/β-catenin通路是PA促进HDPCs矿化的调控途径之一。