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经皮冠脉内自体骨髓单个核细胞和外周血内皮祖细胞移植对小型猪心肌缺血再灌注损伤的作用研究 心肌梗死后,心肌组织发生不可逆损伤,成人的心肌细胞再生能力非常有限,因此,在大面积心肌梗死的患者,随着梗死区的纤维化和疤痕形成,梗死区室壁延展、变薄,发生心室重构,是后期出现心功能不全和心原性死亡的主要原因。近年来,在如何修复心肌坏死所造成的心功能不全方面做了很多研究,细胞再生疗法可能会成为更合理的新的治疗方法。实验研究显示,干细胞移植有助于心肌组织灌注和收缩功能的改善。但是,心功能改善的具体机制尚未明确。 本研究共四部分,在制作小型猪心肌缺血再灌注损伤模型和培养内皮祖细胞的基础上,进行心肌缺血再灌注损伤区经皮冠脉内自体骨髓单个核细胞(BM-MNC)和外周血内皮祖细胞(EPC)移植,评价不同类型细胞移植的疗效差异,并探讨细胞移植后可能的细胞分化机制。 第一部分 结扎法建立小型猪心肌缺血再灌注损伤模型 应用结扎法建立小型猪心肌缺血再灌注损伤模型,为研究干细胞移植对小型猪心肌缺血再灌注损伤后的治疗作用提供实验基础。 选用中国小型猪26头,随机分为模型组(n=25)和假手术组(n=1)。模型组结扎冠状动脉左前降支中远1/3处,90分钟后松开,假手术组只过线不结扎。在结扎冠状动脉前后以及松开时分别进行冠状动脉造影和描记心电图,4周后处死猪,进行心肌组织TTC染色、HE染色和PTAH染色。 造模成功率为92%(23/25),结扎法阻断冠状动脉血流及重新开放血流血管再通的成功率均为100%。模型组心肌组织经病理显微镜检查有坏死心肌。 结扎法是建立小型猪心肌缺血再灌注损伤模型的较好方法,结扎法阻断冠状动脉血流及血管再通的成功率均为100%。