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目的:探索低氧与RELM-β的关系及低氧状态下RELM-β是否通过下游信号通路PLC-IP3-Ca2+促进人肺动脉平滑肌细胞的增殖。方法:实验分为两部分:一、低氧条件下及促进和抑制RELM-β的表达后对人肺动脉平滑肌细胞RELM-β、PLC、IP3R表达的影响及对平滑肌细胞增殖的作用:实验分为8个组:（1）、RELM-β过表达组（慢病毒转染）（2）、过表达对照组（空载慢病毒）（3）、常氧组（4）、低氧组（5）、RELM-β沉默常氧组（慢病毒转染）（6）、沉默常氧对照组（慢病毒空载）（7）、RELM-β沉默低氧组（慢病毒转染）（8）、沉默对照低氧组（慢病毒空载）。取对数生长期的3-5代人肺动脉平滑肌细胞（hPASMCs）,经不含胎牛血清的DMEM/F12培养基培养24h使细胞周期同步化后,用QT-PCR方法和Western blot方法检测RELM-β、PLC、IP3R的表达水平,用EDU试剂盒检测人肺动脉平滑肌细胞的增殖情况。二、重组RELM-β蛋白对人肺动脉平滑肌细胞增殖及PLC/IP3/Ca2+通路的作用:实验分4组:（1）、对照组（2）、加生理盐水后加重组人RELM-β蛋白组（3）、加PLC抑制剂U73122后再加重组人RELM-β蛋白组（4）、加入IP3R抑制剂xestosponginc后加重组人RELM-β蛋白组。分别用QT-PCR方法和Western blot方法检测RELM-β、PLC、IP3R的表达水平,用Fluo-2标记细胞内游离钙([Ca2+]i),共聚焦显微镜检测[Ca2+]i浓度,用EDU试剂盒检测人肺动脉平滑肌细胞的增殖情况。结果:第一部分:低氧、促进及干扰RELM-β表达后对人肺动脉平滑肌细胞RELM-β、PLC、IP3R表达的影响及对平滑肌细胞增殖的作用:低氧组较常氧组:Western blot结果显示RELM-β/PLC/IP3R蛋白表达均增加,分别为（0.511±0.015、0.250±0.051/0.567±0.086、0.415±0.076/0.544±0.127、0.269±0.072）（P<0.05）。QT-PCR结果显示RELM-β/PLC/IP3Rm RNA表达增加（4.670±0.495、2.208±0.357/7.161±1.418、3.963±1.407/4.591±1.237、2.572±0.499）（P<0.05）;EDU免疫荧光结果示细胞增殖增强（31±3.00、16±1.73）（P<0.01）。慢病毒过表达组与空载对照组比较:Western blot结果显RELM-β/PLC/IP3R示蛋白表达增加（0.758±0.016、0.242±0.07/0.733±0.159、0.411±0.063/0.934±0.231、0.236±0.049）（P<0.05）.QT-PCR结果显示RELM-β/PLC/IP3R均表达增加（7.687±1.061、2.226±0.312/10.447±2.802、3.941±1.508/6.600±1.363、2.581±0.495）（P<0.05）;EDU免疫荧光结果示细胞增殖增强（35.33±0.58、27±3.00）（P<0.05）。慢病毒沉默组与空载对照组比较:Western blot结果显示RELM-β/PLC/IP3R蛋白表达降低（0.088±0.057、0.248±0.096/0.120±0.018、0.319±0.055/0.091±0.028、0.201±0.029）（P<0.05）。QT-PCR结果显示RELM-β/PLC/IP3R均表达降低（1.036±0.045、1.753±0.276/1.181±0.094、2.426±0.485/1.051±0.029、1.559±0.032）（P<0.05）;EDU免疫荧光结果示细胞增殖减少（8±2.65、14.33±2.52）（P<0.05）。慢病毒沉默组低氧后与空载对照组低氧后比较:Western blot结果显示RELM-β/PLC/IP3R蛋白表达明显降低（0.107±0.070、0.511±0.135/0.137±0.017、0.603±0.077/0.080±0.006、0.487±0.036）（P<0.05）。QT-PCR结果显示RELM-β/PLC/IP3Rm RNA均表达明显降低（1.066±0.035、4.593±0.487/1.229±0.047、7.029±1.569/1.203±0.122、4.646±1.213）（P<0.05）;EDU免疫荧光结果示细胞增殖明显减少（8.67±2.08、18.33±3.06）（P<0.05）。慢病毒沉默组与慢病毒沉默组低氧后比较:Western blot结果显示RELM-β/PLC/IP3R蛋白表达无明显变化,差异无统计学意义（0.088±0.057、0.107±0.070/0.120±0.018、0.137±0.017/0.091±0.028、0.080±0.006）（P>0.05）。QT-PCR结果显示RELM-β/PLC/IP3R m RNA均表达无明显变化,差异无统计学意义（1.036±0.045、1.066±0.035/1.181±0.094、1.229±0.047/1.051±0.029、1.203±0.122）（P>0.05）;EDU免疫荧光结果示细胞增殖无明显变化,差异无统计学意义（8±2.65、8.67±2.08）（P>0.05）。第二部分:重组RELM-β蛋白对人肺动脉破平滑肌细胞增殖及PLC/IP3/Ca2+通路的作用:加重组人RELM-β蛋白后与对照组比较,PLC/IP3R的蛋白表达明显增加（0.645±0.817、0.155±0.372/0.907±0.096、0.191±0.041）（P<0.05）。PLC/IP3R m RNA的表达明显增加（7.743±0.4651.022±0.013/7.581±0.653、1.045±0.045）（P<0.05）;Fluo-2标记细胞内游离钙检测细胞内钙浓度增加（0.269±0.046、0.153±0.012）（P<0.05）。EDU免疫荧光结果示细胞增殖增强（35±1.00、15.33±4.51）（P<0.05）;加PLC抑制剂U73122后再加重组人RELM-β蛋白与加生理盐水后加重组人RELM-β蛋白组比较,IP3R的蛋白表达明显降低（0.597±0.113、0.907±0.096）（P<0.05）。IP3R m RNA的表达明显降低（2.772±0.334、7.581±0.653）（P<0.05）;Fluo-2标记细胞内游离钙检测细胞内钙浓度降低（0.122±0.023、0.269±0.046）（P<0.05）;EDU免疫荧光结果示细胞增殖减弱（15.67±2.08、35±1.00）（P<0.05）。加入IP3R抑制剂xestosponginc后加重组人RELM-β蛋白与加生理盐水后加重组人RELM-β蛋白组比较,PLC的蛋白表达无明显变化,差异无统计学意义（0.499±0.235、0.645±0.817）（P>0.05）。PLC m RNA的表达差异无统计学意义（3.722±1.215、7.743±0.465）（P>0.05）;Fluo-2标记细胞内游离钙检测细胞内钙浓度降低（0.101±0.014、0.269±0.046）（P<0.05）;EDU免疫荧光结果示细胞增殖减弱（14.67±2.08、35±1.00）（P<0.05）。结论:1、低氧可促进RELM-β、PLC、IP3的表达,且可促进人肺动脉平滑肌细胞的增殖;2、RELM-β可能通过下游信号通路PLC-IP3/Ca2+促进人肺动脉平滑肌细胞增殖。