苦参总碱对人肺腺癌A549细胞的增殖抑制作用的研究

来源 :甘肃中医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mzybbs
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:探究中药苦参中总生物碱对人肺腺癌A549细胞株增殖、细胞周期等方面的影响及对其miRNA表达的改变。  方法:A549细胞培养于含有10%灭活血清的DMEM培养液中,在37℃,5%CO2湿度饱和的培养箱中进行培养。用浓度为0.5mg/ml、1.0mg/ml、1.5mg/ml、2.0mg/ml及2.5mg/ml的苦参总碱分别作用于细胞24小时、48小时、72小时后,以MTT比色法检测苦参总碱对A549细胞增殖的抑制作用;浓度为0.5、1.0、1.5mg/ml苦参总碱分别作用于 A549细胞72小时后,倒置相差显微镜观察 A549细胞的一般形态学变化;Hoechst33258染色后检测细胞凋亡;用流式细胞术(FCM)测定细胞周期,通过蛋白免疫印迹法检测Fas蛋白及VEGF蛋白表达水平的变化;抽取并富集空白组与1.0mg/ml苦参总碱作用72小时后的实验组的miRNA,制作miRNA基因芯片分析实验组与对照组之间miRNA表达谱的差异。  结果:浓度为0.5mg/ml、1.0mg/ml、1.5mg/ml、2.0mg/ml及2.5mg/ml的苦参总碱分别作用A549细胞24小时后,其抑制率分别为(7.46±0.72)%、(17.68±0.93)%、(25.17±1.13)%、(41.90±3.65)%、(49.05±4.72)%;作用于细胞48小时后,其抑制率分别为(14.02±1.23)%、(40.53±1.06)%、(63.28±1.42)%、(75.46±1.13)%、(78.60±3.31)%,作用于细胞72小时后,其抑制率分别为(16.77±1.11)%、(46.87±1.02)%、(74.80±1.12)%、(84.13±1.46)%、(85.01±3.46)%,各实验组与空白组相比有统计学差异(P<0.05),各实验组之间相比有统计学差异(P<0.05)。浓度为0.5mg/ml、1.0mg/ml及1.5 mg/ml的苦参总碱分别作用细胞72h后,G0/G1期细胞百分比分别为(64.43±0.73)%、(76.00±0.60)%、(79.13±0.72)%,S期细胞的百分比为(26.50±1.25)%、(16.30±0.69)%、(14.10±0.55)%,G2期细胞的百分比为(8.10±0.55)%、(7.61±0.68)%、(6.78±0.50)%,各实验组与空白组相比有统计学差异(P<0.05)。用浓度为0.5mg/ml、1.0mg/ml及1.5 mg/ml的苦参总碱分别作用细胞72小时后,Western blotting结果显示,苦参总碱使Fas蛋白的表达水平提高,VEGF蛋白表达水平降低,且变化均有统计学差异(P<0.05),Fas蛋白灰度值分别为127.37±2.32、206.98±1.17和343.00±2.13,VEGF蛋白灰度值分别为408.15±1.13、256.88±1.65和154.35±1.01。miRNA基因芯片对770个miRNA表达情况的检测结果显示,与空白对照组对比,实验组发生改变的miRNA有64个,其中上调的有59个,下调的有5个。  结论:苦参总碱可抑制人肺腺癌A549细胞株的增殖,其作用机制可能与Fas蛋白表达增高,直接杀伤A549细胞、及引起细胞凋亡有关;苦参总碱还可使VEGF蛋白表达降低,从而使 A549细胞的生长、转移受到抑制。此外,苦参总碱能造成A549细胞的miRNA的表达谱发生变化。
其他文献
目的:观察普济消毒饮合透脓散加减联合西医治疗对患者急性化脓性扁桃体炎热毒炽盛证的临床疗效,为临床上针对急性化脓性扁桃体炎患者提供诊疗方法。方法:纳入符合标准的急性
在当前的各种建筑结构中,混凝土的建筑结构占据了大部分,是一种发展迅速、应用范围广泛的建筑结构方法。然而在使用中,由于人为或者自然因素的作用,会使得建筑结构发生一些变化,降
对一维纳米材料在空穴缓冲层PEDOT中的作用进行了研究. 光致发光表明在PEDOT中掺杂一维纳米材料(二氧化钛纳米管和氧化锌纳米棒)可以提高双层样品PEDOT/MEH-PPV的发光效率.
当代中国,发展的机遇前所未有,面临的挑战也前所未有。抓住机遇,应对挑战,需要人们保持朝气蓬勃的精神状态。精神萎靡,暮气沉沉,再好的机遇也会错过。蓬勃的朝气从何而来?学
目的:研究大黄蛰虫丸对颈动脉硬化家兔血清中hs-CRP及Hcy表达的作用,进一步研讨大黄蛰虫丸相关抗炎机制。  方法:使用颈动脉内膜气体干燥损伤法制作兔颈动脉粥样硬化性模型。5
用小粒型优质野败不育系绮A配制了绮优桂 99、绮优 10 2 5和绮优 2 93等 3个小粒型优质感温杂交稻组合 ,千粒重仅 18~2 1g ,主要品质指标达国标优质米标准 ,一般产量与同熟期
本文以嘉兴南洋职业技术学院连锁经营管理专业为例,分析该专业校企合作教学模式中的存在的问题,并结合现状提出改进建议,为连锁经营管理专业发展提供一定的参考。 Taking th
本文通过对荣华二采区10
期刊
伴随着人们对安全生产认识的不断提高,采用先进的高科技术——红外线技术应用于乘人越位上,不但动作灵敏、可靠、还无误动作现象发生,从而替代了拉点器传统的方法。 With pe
身出名门之后,他是我国  最早一批研究人工虫草的人之一  代鑫的孩提时代正值那个风云变幻的年月。蒋家政权撤退大陆的军车没日没夜地从学校后面的川湘公路(今319国道)碾过,尘土遮天,几无宁日。这期间蒋经国还在蒋家组织召开过在大陆的最后一次军事会议……那时的代鑫还不懂这些,只是后来在《残梦》、《黔东南党史》等文史书籍中读到过那一段历史。  代鑫自小便接受着良好的教育,六十年代时他考上了今天的哈工大,但