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目的：
胰岛素瘤(insulinoma)是起源于胰岛β细胞最常见一种胰腺内分泌肿瘤,其不依赖血糖变化而分泌和释放过量的胰岛素。艾塞那肽(Exenatide)是合成的胰高血糖素样肽-1(Glucagon Like Peptide-1,GLP-1)类似物,其主要作用是促进胰岛细胞葡萄糖依赖性的分泌胰岛素,并可保持β细胞形态、通过cAMP和/或其他细胞内信号传导通路抑制前凋亡基因的表达、减少其凋亡和改善葡萄糖依赖的分泌功能来实现胰岛β细胞数量的增加。本研究观察艾塞那肽在不同浓度不同作用时间对胰岛素瘤RIN-m5F细胞和胰岛细胞葡萄糖激酶(Glucokinase,GK)、葡萄糖转运蛋白-2(Glucose transporter-2,GLUT-2)mRNA表达水平的影响及胰岛素分泌量的变化,初步探讨艾塞那肽能否改善胰岛素瘤RIN-m5F细胞葡萄糖依赖性分泌胰岛素的特性,为其进一步临床应用提供一定的实验依据。
方法：
本实验采用明尼苏达大学改良方法分离纯化大鼠胰岛细胞。ELISA检测胰岛素瘤RIN-m5F细胞和胰岛细胞在上述艾塞那肽不同浓度不同作用时间点胰岛素分泌量的变化。采用Real time RT-PCR法检测胰岛素瘤RIN-m5F细胞、大鼠胰岛细胞和成纤维细胞在艾塞那肽不同浓度不同作用时间点葡萄糖激酶(GK)、葡萄糖转运蛋白-2(GLUT-2)mRNA表达的水平。
结果：
胰岛素瘤RIN-m5F细胞和胰岛细胞在艾塞那肽不同浓度(50,100,200pg/ml)作用24小时及浓度为100pg/ml作用12h,24h,36h后收集细胞培养液检测胰岛素分泌量。结果显示:在艾塞那肽作用下胰岛素瘤RIN-m5F细胞随浓度增高和时间的改变胰岛素分泌量呈略微下降趋势,降低其分泌胰岛素。而胰岛细胞胰岛素分泌量呈略微升高趋势,可促进其分泌胰岛素。
在上述艾塞那肽不同浓度不同作用时间胰岛素瘤RIN-m5F细胞和胰岛细胞GK、GLUT-2 mRNA表达水平显著高于作为对照成纤维细胞(P＜0.05);胰岛素瘤RIN-m5F细胞和胰岛细胞GK、GMJT-2 mRNA表达量与艾塞那肽呈剂量-时间负相关。
结论：
艾塞那肽可促进胰岛细胞的胰岛素分泌。胰岛素瘤RIN-m5F细胞GK、GLUT-2mRNA表达水平低,与其缺乏对葡萄糖变化敏感性有关。艾塞那肽能够上调胰岛素瘤RIN-m5F细胞GK、GLUT-2 mRNA表达;可使其减少胰岛素的分泌。有利于改善胰岛素瘤RIN-m5F细胞葡萄糖依赖性的分泌胰岛素。